詳細(xì)介紹
小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Mouse Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Mouse Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
酸球菌 Lactococcus lactis
日本根霉
Ishikawa, 人子宮內(nèi)膜細(xì)胞系
人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶
人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞
胰凝蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓gersion
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
MCF-7(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
黑木耳 Auricularia auricula
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 Mouse
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
三硝基苯甲基硝胺梭菌 Clostridium saccharoacetobutylicim
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
擬囊體側(cè)耳 Pleurotus cystidiosus
消化桿菌 Lactobacillus alimentarius
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
牛舌菌、肝色牛排菌 Fistulina hepatica
HT-29, 人結(jié)腸細(xì)胞
弗氏鏈霉菌 Streptomyces fradiae
奇異變形桿菌 Proteus mirabilis
短小芽胞桿菌 Bacillus pumilus
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
Calu-1(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人胃腺細(xì)胞英文名稱:AGS 13,14-dihydro Prostaglandin F2α (50 mg)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prost-5Z-en-1-oic acid; 13,14-dihydro PGF2α; 13,14-dihydro Prostaglandin F2α
Latanoprost ethyl amide (50 mg)N-ethyl-9。alpha。,11。alpha。,15R-trihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prost-5Z-en-1-amide; Lat-NEt; Latanoprost ethyl amide
Beraprost (sodium salt) (5 mg)2,3,3a,8b-tetrahydro-2-hydroxy-1-(3-hydroxy-4-methyl-1-octen-6-ynyl)-1H-cyclopenta[b]benzofuran-5-butanoic acid, monosodium salt; ML 1129|Procyclin|TRK 10Beraprost (sodium salt)
Leukotriene C4 (25 ug)5S-hydroxy-6R-(S-glutathionyl)-7E,9E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; LTC4; Leukotriene C4
5-OxoETE-d7 (25 ug)5-oxo-6E,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-6,8,9,11,12,14,15-d7 acid; 5-KETE-d7; 5-OxoETE-d7
15(S)-HETrE (500 ug)15S-hydroxy-8Z,11Z,13E-eicosatrienoic acid; 15(S)-HETrE
Methoxylamine HCl (500 dtn (0。5 g))Methoxylamine HCl
Prostaglandin E2 EIA Standard (1 ea)Prostaglandin E2 EIA Standard
COX Inhibitor Screening Assay Stannous Chloride (1 ea)Stannous Chloride; COX Inhibitor Screening Assay Stannous Chloride
HQL-79 FP Positive Control (1 ea)HQL-79 Fluorescence Polarization Positive Control; HQL-79 FP Positive Control
Tris-Acetate EDTA Stock Solution (50X, pH 8。0) (1 L)TAE Buffer; Tris-Acetate EDTA Stock Solution (50X, pH 8。0)
2-O-methyl PAF C-18 (5 mg)3,5,9-trioxa-4-phosphaheptacosan-1-aminium, 4-hydroxy-7R-methoxy-N,N,N-trimethyl-4-oxide; ET-18-OCH3|Edelfosine|1-O-octadecyl-2-O-methyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; 2-O-methyl PAF C-18
Fumonisin B1 (1 mg)1,2,3-propanetricarboxylic acid, 1,-1’-[1-(12-amino-4,9,11-trihydroxy-2-methyltridecyl)-2-(1-methylpentyl)-1,2-ethanediyl] ester; Fumonisin B1
Methyltransferase Colorimetric Mixture (1 ea)MT Colorimetric Mixture; Methyltransferase Colorimetric Mixture
LSD Formaldehyde Standard (100 uL)LSD Formaldehyde Standard
小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa試劑盒操作步驟 (R)-Flurbiprofen (10 mg)(R)-(-)-2-fluoro-α-methyl-4-biphenylacetic acid; E-7869|Flurizan|Tarenflurbil; (R)-Flurbiprofen
Aconitase NADP+ Reagent (1 ea)NADP+ Reagent; Aconitase NADP+ Reagent
Rosmarinic Acid (10 mg)(R)-。alpha。-[[3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-oxo-2E-propenyl]oxy]-3,4-dihydroxy-benzenepropanoic acid; Rosmarinic Acid
Mn(III)TBAP (25 mg)Mn(III)tetrakis(4-benzoic acid) porphyrin chloride; Mn(III)TBAP