詳細(xì)介紹
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Mouse Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Mouse Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
桿菌屬 Lactobacillus sp.
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
PANC-1, 人胰腺細(xì)胞
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
TT(人甲狀腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
PA-1(人卵巢腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
球孢白僵菌 Beauveria bassiana
香菇 Lentinula edodes
藤黃微球菌 Micrococcus luteus
苜蓿中華根瘤菌
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
人膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
疣孢脆柄菇 Psathyrella velutina
B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:HEL(懸?。?/span>
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人結(jié)腸細(xì)胞英文名稱:COLO 205
脂鏈球菌 Streptococcus cremoris
KB/鼻咽細(xì)胞株國產(chǎn)
糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus ML-090 (25 mg)5,12-dihydro-quinoxalino[2,3-b]quinoxaline; CCG-44699|CID-616479|NSC 179821|Fluoflavin; ML-090
Dovitinib (5 mg)4-
CBP bromodomain Europium Chelate (420 wells)CBP bromodomain Europium Chelate
N-acetyl-3,4-Methylenedioxymethcathinone (50 mg)N-
ABT-888 (hydrochloride) (5 mg)Veliparib; 2-[(2R)-2-methyl-2-pyrrolidinyl]-1H-benzimidazole-7-carboxamide, dihydrochloride
GW 4064 (10 mg)3-[2-[2-chloro-4-[[3-(2,6-dichlorophenyl)-5-(1-methylethyl)-4-isoxazolyl]methoxy]phenyl]ethenyl]-benzoic acid
SR 1664 (25 mg)4’-[[2,3-dimethyl-5-[[[(1S)-1-(4-nitrophenyl)ethyl]amino]carbonyl]-1H-indol-1-yl]methyl]-[1,1’-biphenyl]-2-carboxylic acid
(±)15-HEPE (50 ug)(±)-15-hydroxy-5Z,8Z,11Z,13E,17Z-eicosapentaenoic acid; (±)15-HEPE
(±)5,6-DHET lactone (100 ug)(±)5,6-dihydroxy-8Z,11Z,14Z-eicosatrienoic acid, 1,5-lactone; (±)5,6-DiHETrE lactone; (±)5,6-DHET lactone
Platencin (100 ug)3-[[3-[(2S,8S)-1,3,4,7,8,8aR-hexahydro-8-methyl-3-methylene-7-oxo-2H-2,4aS-ethanon-aphthalen-8-yl]-1-oxopropyl]amino]-2,4-dihydroxy-benzoic acid
Thioridazine (hydrochloride) (10 g)Aldazine|Mellaril; 10-[2-(1-methyl-2-piperidinyl)ethyl]-2-(methylthio)-10H-phenothiazine, hydrochloride
Cathepsin G Inhibitor I (1 mg)P-
AM580 (10 mg)CD336|NSC 608001|Ro 40-6055; 4-
4-fluoro PV8 (hydrochloride) (1 mg)4-fluoro α-PHPP|para-fluoro-PV8; 1-(4-fluorophenyl)-2-(pyrrolidin-1-yl)heptan-1-one, monohydrochloride
Modafinil (5 mg)CEP 1538|Nuvigil|Provigil; 2-[(diphenylmethyl)sulfinyl]-acetamide
4-methoxy PV8 (hydrochloride) (5 mg)4-MeO-PV8|4-methoxy PHPP|p-MeO-PV8; 1-(4-methoxyphenyl)-2-(pyrrolidin-1-yl)heptan-1-one, monohydrochloride
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟ICI 118551 (hydrochloride) (25 mg)(2R,3R)-rel-1-[(2,3-dihydro-7-methyl-1H-inden-4-yl)oxy]-3-[(1-methylethyl)amino]-2-butanol, monohydrochloride
N-hydroxy MDA (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)MDOH|N-hydroxy-3,4-Methylenedioxyamphetamine; N-hydroxy-α-methyl-1,3-benzodioxole-5-ethanamine, monohydrochloride