詳細(xì)介紹
小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Mouse interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Mouse interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),可和所購(gòu)經(jīng)銷(xiāo)商, 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
根瘤菌 Rhizobium sp.
人小腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuum
涇陽(yáng)鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis
類(lèi)植物桿菌 Lactobacillus paraplantarum
TE-13(人食管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞
SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞
MGC80-3(MGC-803)人胃細(xì)胞gersion
酸球菌 Lactococcus lactis
MDCK(犬腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
吉丹鏈霉菌 Streptomyces gedanensis
EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 Rattus
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
傘卷霉 Circinellaum umbellate
香菇屬 Lentinula sp.
小鼠前脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
毛柄金錢(qián)菌(金針菇) Flammulina velutipes
MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2
根瘤菌 Rhizobium sp.
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
PIEC(豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2
人小小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa試劑盒操作步驟網(wǎng)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
NRK(大鼠腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion * (hydrochloride) (10 mg)4-FF|NIH 10491|p-FF; N-(4-fluorophenyl)-N-[1-(2-phenylethyl)-4-piperidinyl]-prop*, monohydrochloride
Ganglioside GQ1b (sodium salt) (100 ug)Ganglioside GQ1b, tetrasodium salt
2C-B (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)4-Bromo-2,5-dimethoxyphenethylamine; 4-bromo-2,5-dimethoxy-benzeneethanamine, monohydrochloride
Maprotiline (hydrochloride) (50 mg)Deprilept|Ludiomil
L-Norpseudoephedrine (10 mg)(-)-Norpseudoephedrine; (αR)-α-[(1R)-1-aminoethyl]-benzenemethanol
Adenosine 2′-monophosphate (250 mg)2′-AMP; 2’-adenylic acid
N-Acetyl-4-benzoquinone imine (500 ug)N-Acetyl-p-benzoquinonimine|NAPQI; N-(4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ylidene)-acetamide
PluriSln 1 (10 mg)NSC 14613|N’-phenyl-hydrazine-Isonicotinic acid; 2-phenylhydrazide-4-pyridinecarboxylic acid
AWD 131-138 (5 mg)Imepitoin; 1-(4-chlorophenyl)-1,5-dihydro-4-(4-morpholinyl)-2H-imidazol-2-one
Trametinib (1 mg)GSK 1120212|JTP-74057; N-[3-[3-cyclopropyl-5-[(2-fluoro-4-iodophenyl)amino]-3,4,6,7-tetrahydro-6,8-dimethyl-2,4,7-trioxopyrido[4,3-d]pyrimidin-1(2H)-yl]phenyl]-acetamide
AB-CHMINACA metabolite M4 (1 mg)1-(cyclohexylmethyl)-1H-indazole-3-carboxylic acid
Trimethoprim (50 g)Trimpex; 5-[(3,4,5-trimethoxyphenyl)methyl]-2,4-pyrimidinediamine
BIBR 1532omerase Inhibitor X; 2-[[(2E)-3-(2-naphthalenyl)-1-oxo-2-buten-1-yl]amino]-benzoic acid
小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa試劑盒操作步驟ZM 39923 (hydrochlorideJAK3 Inhibitor IV; 3-[(1-methylethyl)(phenylmethyl)amino]-1-(2-naphthalenyl)-1-propanone, monohydrochloride
BRD73954 (10 mg)N1-hydroxy-N3-(2-phenylethyl)-1,3-benzenedicarboxamide
Atipamezole (hydrochloride) (25 mg)Antisedan; 5-(2-ethyl-2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-1H-imidazole, monohydrochloride