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小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
大豆慢生根瘤菌
中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
小鼠真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
普通變形菌 Proteus vulgaris
黑木耳 Auricularia auricula
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
橢圓釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae var.ellipsoideus
NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
光帽鱗傘 Pholiota nameko
漏斗狀側(cè)耳 Pleurotus sajor-caju
羽扇豆根瘤菌 Bradyrhizobium lupini
苜蓿中華根瘤菌
HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大腸桿菌 Escherichia coli
鞘氨醇桿菌屬 Sphingobacterium sp.
小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:L1210
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
CA46(人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
人臍帶單核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14)5×106cells/瓶×2
EL-4全細(xì)胞裂解液100μg100μg
屎腸球菌 Enterococcus faecium
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti ML-336 (1 mg)(E)-2-((1,4-dimethylpiperazin-2-ylidene)amino)-5-nitro-N-phenylbenzamide
PB-22 RM (5 mg)QUPIC; 1-pentyl-8-quinolinyl ester-1H-indole-3-carboxylic acid
SureLight B-Phycoerythrin (B-PE) (1 mg)SureLight B-Phycoerythrin (B-PE)
生物素標(biāo)記組蛋白H4多肽(氨基:1-21)Biotinylated Histone H4 Peptide (residues 1-21) (200 ul)
Z-VAD-FMK, Caspase-Family抑制劑(氟甲基酮)Z-VAD-FMK
Sunitinib Maleate, SU-11248, Sutent, PHA-290940AD, PNU-290940ADSunitinib Malate (Sutent)
4-(Acetylamino)-N-(2-aminophenyl)benzamide, Acetyldinaline, GCI-994
THUTetrahydrouridine
2-[[3-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-oxo-2-propenyl]amino]benzoic acid; SB 252218Tranilast
N-[(5aR,6aS,7S,9Z,10aS)-9-[amino(hydroxy)methylidene]-4,7-bis(dimethylamino)-1,10a,12-trihydroxy-8,10,11-trioxo-5,5a,6,6a,7,8,9,10,10a,11-decahydrotetracen-2-yl]-2-(tert-butylamino)acetamideTigecycline
5,7,4’-Trihydroxyflavanone; 2,3-dihydro-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-4H-1-benzopyran-4-one; NGENNaringenin
1-(2-Chlorophenyl)-N-methyl-N-(1-methylpropyl)-3-isoquinolinecarboxamidePK 11195
5-Dehydroepiandrosterone; Dehydroisoandrosterone; PrasteroneDHEA
(2R,6aS,12aS)-1,2,12,12a-Tetrahydro-8,9-dimethoxy-2-(1-(1-methylethenyl)-[1]benzopyrano[3,4-b]furo[2,3-][1]benzopyran-6(6aH)-oneRotenone
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 Hydroxy-2,3-dixopyrrolidine-3-sulfonic acid sodium salt; Sulfo-NHS; SNHS; N-Hydroxysulfosuccinimide sodium saltSulfo-NHS
N-Acetyl-D-erythro-sphingosineC2 Ceramide
2-(4-Bromo-2-chlorophenoxy)-N-[[[4-ZCL278
2-(4-tert-Butylphenyl)-1H-benzimidazole, 2-[4-(1,1-Dimethylethyl)phenyl]-1H-benzimidazoleZLN005