詳細(xì)介紹
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
苜蓿中華根瘤菌
Goat Anti Rabbit IgG-Biotin(Ready to Use)/山羊抗兔IgG,Biotin(IHC工作液)3ml、18ml國產(chǎn)
大腸桿菌 Escherichia coli
日本根霉 Rhizopus japonicus
小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:M1
屎腸球菌 Enterococcus faecium
A549, 人肺細(xì)胞系
Improved-Hematoxylin/改良型蘇木素(IHC常用復(fù)染試劑)10ml國產(chǎn)
赭綠青霉 Penicillium ochrochloron
Calu-1(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
屎腸球菌 Enterococcus faecium
淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus
柄木霉*
大鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱:H-4-II-E
三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii
人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL Proscillaridin A (5 mg)(3β)-3-[(6-deoxy-α-L-mannopyranosyl)oxy]-14-hydroxy-bufa-4,
Yangonin (5 mg)4-methoxy-6-[(1E)-2-(4-methoxyphenyl)ethenyl]-2H-pyran-2-one
25N-NBOMe (hydrochloride) (50 mg)2;C-N-NBOMe; 2-(2,5-dimethoxy-4-nitrophenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethanamine, monohydrochloride
IWP-L6 (10 mg)PORCN Inhibitor III|Wnt Pathway Inhibitor XIX; N-(5-phenyl-2-pyridinyl)-2-[(3,4,6,7-tetrahydro-4-oxo-3-phenylthieno[3,2-d]pyrimidin-2-yl)thio]-acetamide
4-methoxy-α-Pyrrolidinobutiophenone (hydrochloride) (5 mg)4-MeOPBP; 1-(4-methoxyphenyl)-2-(pyrrolidin-1-yl)butan-1-one, monohydrochloride
Pinacidil (hydrate) (100 mg)N-cyano-N’-4-pyridinyl-N’’-(1,2,2-trimethylpropyl)-guanidine, monohydrate
* (hydrochloride) (1 mg)4-FF|NIH 10491|p-FF; N-(4-fluorophenyl)-N-[1-(2-phenylethyl)-4-piperidinyl]-prop*, monohydrochloride
Ganglioside GT1b (sodium salt) (5 mg)Ganglioside G1; Ganglioside GT1b, trisodium salt
4-bromo-2,5-DMA (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)4-bromo-2,5-Dimethoxyamphetamine|DOB|Dimethoxybromoamphetamine; 4-bromo-2,5-dimethoxy-α-methyl-benzeneethanamine, monohydrochloride
Maprotiline (hydrochloride) (100 mg)Deprilept|Ludiomil
MF498 (5 mg)N-[[[4-(5,9-diethoxy-6,8-dihydro-6-oxo-7H-pyrrolo[3,4-g]quinolin-7-yl)-3-methylphenyl]methyl]sulfonyl]-2-methoxy-benzeneacetamide
Adenosine 2′-monophosphate (100 mg)2′-AMP; 2’-adenylic acid
N-Acetyl-4-benzoquinone imine (5 mg)N-Acetyl-p-benzoquinonimine|NAPQI; N-(4-oxo-2,5-cyclohexadien-1-ylidene)-acetamide
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法Acetyl Coenzyme A (sodium salt) (5 mg)Acetyl-CoA; S-acetate coenzyme A, trisodium salt
AWD 131-138 (25 mg)Imepitoin; 1-(4-chlorophenyl)-1,5-dihydro-4-(4-morpholinyl)-2H-imidazol-2-one
TGR5 Receptor Agonist (5 mg)3-(2-chlorophenyl)-N-(4-chlorophenyl)-N,5-dimethyl-4-isoxazolecarboxamide