詳細(xì)介紹
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Mouse coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Mouse coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)elisa試劑盒實驗方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
植物桿菌 Lactobacillus Plantarum
EB-3(人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
香菇 Lentinula edodes
HGC-27人胃細(xì)胞
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
純白鏈霉菌 Streptomyces candidus
爪哇根霉 Rhizopus javanicus
糞產(chǎn)堿菌 Alcaligenes faecalis
谷氨酸棒桿菌Ⅹ型 Agrobacterium tumefaciens
B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
絳紅小單孢菌 Micromonospora purpurea
根瘤菌
小鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
IM-9(人外周血B淋巴細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
SW579(人甲狀腺鱗細(xì)胞 )5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
NCI-H292(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 Mouse
裂褶菌
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
香菇 Lentinula edodes
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢腺細(xì)胞系
雙孢蘑菇Prostaglandin Screening Library II (96-Well) (200 ul)Prostaglandin Compound Screening Library 2
(±)9-HEPE (100 ug)(±)-9-hydroxy-5Z,7E,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid; (±)9-HEPE
14(15)-EET methyl ester (250 ug)(±)14(15)-epoxy-5Z,8Z,11Z-eicosatrienoic acid, methyl ester; 14(15)-EpETrE methyl ester; 14(15)-EET methyl ester
Thrombin (human) (1 KU)Activated Factor II [IIa]
(S)-Duloxetine (hydrochloride) (100 mg)Cymbalta|Dulane 20|LY248686; N-methyl-γS-(1-naphthalenyloxy)-2-thiophenepropanamine, monohydrochloride
25I-NBOH (hydrochloride) (1 mg)2;C-I-NBOH; 2-(((4-iodo-2,5-dimethoxyphenethyl)amino)methyl)phenol, monohydrochloride
Ko 143 (10 mg)(3S,6S,12aS)-1,2,3,4,6,7,12,12a-octahydro-9-methoxy-6-(2-methylpropyl)-1,4-dioxo-pyrazi’,2’:1,6]pyrido[3,4-b]indole-3-propanoic acid 1,1-dimethylethyl ester
YZ9 (5 mg)7-hydroxycoumarin-3-Carboxylic Acid ethyl ester; 7-hydroxy-2-ozo-2H-1-benzopyran-3-carboxylic acid, ethyl ester
Pitavastatin (calcium salt) (100 mg)Itabastatin|Itavastatin|NK 104; (3R,
L-Glutathione, oxidized (sodium salt) (250 mg)GSSG; L-g-glutamyl-L-cysteinyl-bimol-(2→2’)-disulfide-glycine, disodium salt
Ganglioside GD1a (sodium salt) (1 mg)Ganglioside B1|Ganglioside G3; Ganglioside GD1a, tetrasodium salt
Δ8-THC (exempt preparation) (1 mg)NSC 134453|Δ8-Tetrahydrocannabinol; 6aR,7,10,10aR-tetrahydro-6,6,9-trimethyl-3-pentyl-6H-dibenzo[b,d]pyran-1-ol
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)elisa試劑盒實驗方法Doxepin (hydrochloride) (10 mg)Sinequan; 3-(dibenz[b,e]oxepin-11(6H)-ylidene)-N,N-dimethyl-1-propanamine, monohydrochloride
MMB2201 (1 mg)I-AMB; methyl (1-(5-fluoropentyl)-1H-indole-3-carbonyl)-L-valinate
Guanosine 5′-triphosphate (sodium salt hydrate) (25 mg)GTP;
TIQ-A (500 ug)thieno[2,