詳細(xì)介紹
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
儲存條件:冷凍(-20℃) 技術(shù)規(guī)格 Band 200,400,600,800,1000,1500,2000,2500,3000,4000,5000,6000,8000,10037 bp Storage Buffer 10mMTris-HCl(pH 8.0),1.0 mM EDTA,0.033%bromophenol blue,0.008%xylene cyanoland 10%glycerol. |
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
DNA Ladder Q (250~10001bp) | 100次 | GOY-F10139 |
DNA提取流程圖:
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit 6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one 43200-81-3 中文名: 分子式:C11H7ClN4O2
兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 5α-Androstanedione 846-46-8 中文名:5α-雄甾烷二酮 分子式:C19H28O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit 5α-Androstanedione 中文名:5α-雄甾烷二酮 分子式:C19H28O2 度:98.0%
兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 5α-Androstanedione 846-46-8 中文名:5α-雄甾烷二酮 分子式:C19H28O2
兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit 6-Chloroguanine riboside 2004/7/1 中文名:6-氯鳥嘌呤核苷 分子式:C10H12ClN5O4
石英砂(AR,6-10目或2-3mm) Sand 質(zhì)量規(guī)格:AR,6-10目或2-3mm 人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA檢測試劑盒HumanHelicobacterpyloriIgM,Hp-IgMELISAKit 96T/48T
石英砂(AR,8-16目或1-2mm) Sand 質(zhì)量規(guī)格:AR,8-16目或1-2mm 大鼠循環(huán)復(fù)合物(CIC)試劑盒 Rat circulating immune complex,CIC ELISA Kit
二氫銨(SP) Ammonium phosphate monobasic 質(zhì)量規(guī)格:SP 英文名稱RatmajorhistocompatibilitycomplexELISAKit大鼠組織相容性復(fù)合物(MHC)規(guī)格:96T/48T
二甲基亞砜(光譜級,>99.9% (GC)) Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:光譜級,>99.9% (GC) 鈣離子膜通道鈣泵(F型ATP酶/線粒體、葉綠體)功能熒光檢測試劑盒20
N,N-二甲基乙酰胺(光譜級,≥99.8%(GC)) N-N-Dimethylacetamide 質(zhì)量規(guī)格:光譜級,≥99.8%(GC) ELISAKitLp-α人脂蛋白α規(guī)格:48T/96T
二甲基亞砜(ACS,光譜級) Dimethyl sulfoxide 質(zhì)量規(guī)格:ACS,光譜級 小鼠細(xì)胞抗原75(LY75)ELISA試劑盒 ,英文名: LY75 ELISA Kit
乙二(光譜 ,≥99%) Ethylene glycol 質(zhì)量規(guī)格:光譜 ,≥99% 人脂肪酶(Lipase)ELISA檢測試劑盒HumanLipaseELISAKit 96T/48T
甘油(for spectroscopy,≥99.5%) Glycerol in water for HPLC verification 質(zhì)量規(guī)格:for spectroscopy,≥99.5% 大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒 Rat Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit
(SP) Lithium carbonate 質(zhì)量規(guī)格:SP 英文名稱RatmajorhistocompatibilitycomplexELISAKit大鼠組織相容性復(fù)合物(MHC)規(guī)格:96T/48T
新亞銅試劑鹽酸鹽一水合物(99%) Neocuproine monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:0.99 鈣離子膜通道鈣泵PMCA(P型ATP酶/質(zhì)膜)功能熒光檢測試劑盒20
DNA Marker Q(250~10001bp)組織EPHB4激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞EPHB4激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織EPHB3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞EPHB3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織EPHB2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。