詳細(xì)介紹
DNA提取流程圖:
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
PEG | 100g | GOY-F10148 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
聚乙二是一種廣泛使用的核酸探針雜交的促進(jìn)劑,與硫酸葡聚糖相比,PEG具有分子量小(6000~8000)、粘度低、價格低廉本等優(yōu)點,但它不能完成取代硫酸葡聚糖。使用促進(jìn)劑時建議優(yōu)化條件。 儲存條件:常溫運(yùn)輸和保存、有效期一年。 |
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔緊張素II(rabbit Angiotensin-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 6,6'-Di-O-sinapoylsucrose 1068661-35-7 中文名:6,6'- 二芥子?;崽?/span> 分子式:C34H42O19
兔緊張素Ⅱelisa試劑盒 兔緊張素Ⅱ試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔緊張素Ⅱ試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔緊張素Ⅱ試劑盒、兔緊張素Ⅱ elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5-Benzyloxyindole 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO
兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 5-Benzyl-1H-tetrazole 中文名:5-芐基-1H-四唑 分子式:C8H8N4O
兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISAKit 5-O-Ethylcleroindicin D 中文名: 分子式:C10H16O4 度:%
兔心脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit H-FABP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S
苯硫醚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)) Diphenyl sulfide 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC) Mouseserine/threonineproteinkinase,STKELISA試劑盒小鼠絲/蘇蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4,4'-二氨基二苯醚(ODA)(標(biāo)準(zhǔn)品) 4,4′-Diaminodiphenyl ether 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠蘭尼定受體1(RYR1)ELISA試劑盒 ,英文名: RYR1 ELISA Kit
二十二烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) Docosane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 人前膠原C端肽酶(PCP)ELISA檢測試劑盒HumanprocollagenCpeptidase,PCPELISAKit 96T/48T
4,4'-二氨基二苯硫醚(標(biāo)準(zhǔn)品) 4,4'-Thiodianiline 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血小板膜糖蛋白IIb(GPIIb)試劑盒 Rat Platelet membrane glycoprotein IIb,GPIIb ELISA Kit
丙位十二內(nèi)酯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC)) γ-Dodecalactone 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.5%(GC) 英文名稱RatansferrieceptorELISAKit大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)規(guī)格:96T/48T
精噁唑禾草靈(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenoxaprop-P 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 鈣交換體(NCX)蛋白共沉淀分析試劑盒5
6-羥基(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC)) 6-Hydroxynicotinic Acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC) ELISAKitPS-2人早老素2規(guī)格:48T/96T
正庚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC)) 1-Heptanol 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC) 小鼠賴酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)ELISA試劑盒 ,英文名: LOXL2 ELISA Kit
茚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,>99.0%(GC)) Indene 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析,>99.0%(GC) 人黑色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)ELISA檢測試劑盒Humanmelanoma-associatedaigen,MAGEELISAKit 96T/48T
二十烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) Eicosane 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)試劑盒 Rat Platelet membrane glycoprotein Ib,GPIb ELISA Kit
聚乙二組織ROCK激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞ROCK激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織ROCK-I激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞ROCK-I激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織ROCK-II激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))