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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-22 10:46:01瀏覽次數(shù)：153
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | GOY-F10153 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 僅供科研使用 |
下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
Super hybrid solution(In situ hybridization) | 10mL | GOY-F10153 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
本產(chǎn)品為我司開(kāi)發(fā)的即用型原位雜交專(zhuān)用核酸雜交液。既可以用于RNA原位雜交、DNA原位雜交，也可以用于FISH原位雜交等試驗(yàn)。 原位雜交是在一定生物結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)之上的核酸雜交。這種結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)可以是一條染色體；一個(gè)細(xì)菌；更大結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是細(xì)胞和組織?；驹硎莾蓷l核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，通過(guò)氫鍵結(jié)合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA 雙鍵分子，應(yīng)用帶有標(biāo)記的(有放射性同位素，如3H、35S、32P、熒光素、等非放射性物質(zhì))DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細(xì)胞內(nèi)待測(cè)核酸(RNA或DNA)片段進(jìn)行雜交，然后可用放射自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的mRNA或DNA的存在并定位；用原位雜交技術(shù)，可在原位研究細(xì)胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達(dá)。此方法有很高的敏感性和特異性，可進(jìn)一步從分子水平來(lái)探討細(xì)胞的功能表達(dá)及其調(diào)節(jié)機(jī)制。已成為當(dāng)今細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)研究的重要手段。 儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸和-20℃保存、有效期一年。 |
DNA提取流程圖：
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過(guò)夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過(guò)TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí)，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見(jiàn)后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔損傷分子-1(rabbit Kim-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 67219-55-0 中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三)-N(4)-苯甲?；?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式：C37H35N3O7
兔素(Renin)ELISA試劑盒 5-Benzyl D-glutamate 2578-33-8 中文名：D-谷5-苯甲酯 分子式：C12H15NO4 度：98.0%
兔素(Renin)ELISAKit 5-Benzoylpentanoic acid 4144-62-1 中文名：5-苯甲?；焖?/span> 分子式：C12H14O3 度：98.0%
兔素(rabbit Renin) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Aminosalicylic acid 中文名：4-氨基水楊酸 分子式：C7H7NO3 度：98.0%
兔瘦素(rabbit Leptin) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Hydroxymethylfurfural 中文名：5-羥甲基糠醛 分子式：C6H6O3 度：%
克螨特標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/ml) Propargite solution 質(zhì)量規(guī)格：1.00mg/ml 人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanvoltage-gatedcalciumchannel,VGCCELISAKit 96T/48T
三氯殺蟲(chóng)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%) Plifenat solution 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2% 大鼠血栓素合成酶(TXAS)試劑盒 Rat thromboxane syhase,TXAS ELISA Kit
三氯殺蟲(chóng)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) Plifenat solution 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2% 英文名稱(chēng)RatTumornecrosisfactorαELISAKIT大鼠腫瘤壞死因子α(TNFα)ELISAKIT規(guī)格：96T/48T
霜霉威(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%) Propamocarb 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% 肝素(heperin)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
解毒喹(標(biāo)準(zhǔn)品) Cloquintocet-mexyl 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitPCDH1人原鈣黏素1規(guī)格：48T/96T
綠麥隆標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%) Chlortoluron solution 質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4% 小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白16(CC16)ELISA試劑盒 ，英文名： CC16 ELISA Kit
敵草隆(99%) Diuron 質(zhì)量規(guī)格：0.99 人抗鼠抗體(HAMA)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanaimousaibody,HAMAELISA 96T/48T
四螨嗪(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6%) Clofentezine 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.6% 大鼠血栓素B2(TXB2)試劑盒 Rat Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit
非草隆(標(biāo)準(zhǔn)品) Fenuron 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱(chēng)RatGCP-2ELISAKit大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2)規(guī)格：96T/48T
丁(B9)(標(biāo)準(zhǔn)品) Daminozide 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 肝素(heperin)纖維蛋白檢測(cè)法(Fibrometer)分析試劑盒50
超級(jí)雜交液(原位雜交)細(xì)胞PKD2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
組織PKCι激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
細(xì)胞PKCι激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
組織PKCθ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
細(xì)胞PKCθ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
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