產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
基因芯片是將大量靶基因(DNA片段)有序地、高密度地點(diǎn)在玻璃片或硅片或塑料片上等載體上所形成的矩陣?;蛐酒s交一般情況下是將待測的兩種樣品(主要是RNA樣品)分別用Cy3和Cy5兩種熒光染料標(biāo)記,制備成探針與芯片雜交,雜交信號(hào)用激光掃描儀檢測,計(jì)算機(jī)分析檢測結(jié)果,可獲得類似與傳統(tǒng)的點(diǎn)雜交的雜交數(shù)據(jù),以達(dá)到快速、高效、高通量及平行性的分析表達(dá)譜的目的。本產(chǎn)品為即用型芯片專用的雜交液,可用于各種標(biāo)記的探針(主要是Cy3和Cy5標(biāo)記的RNA探針)跟基因芯片的雜交實(shí)驗(yàn)。 儲(chǔ)存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。 |
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
超級(jí)雜交液(芯片) | Super hybrid solution(chip) | 10mL | GOY-F10154 |
DNA提取流程圖:
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
兔神經(jīng)元烯化酶(rabbit NSE) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Formyl-2-furylboronic acid 中文名: 分子式:C5H5BO4 度:98.0%
兔神經(jīng)營養(yǎng)素3(rabbit -3) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 6,6'-Di-O-sinapoylsucrose 中文名:6,6'- 二芥子?;崽?/span> 分子式:C34H42O19 度:97.0%
兔神經(jīng)生長因子(rabbit NGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 6,7-Dihydroneridienone A 72959-46-7 中文名: 分子式:C21H28O3
兔神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒 5-Benzyl D-glutamate 2578-33-8 中文名:D-谷5-苯甲酯 分子式:C12H15NO4
兔上(rabbit EPI) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Amino-1-naphthol 中文名:5-氨基-1-萘酚 分子式:C10H9NO
避蚊胺(99%) DEET 質(zhì)量規(guī)格:0.99 ELISAKitProtamine人規(guī)格:48T/96T
特丁通(標(biāo)準(zhǔn)品) Terbumeton 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)ELISA試劑盒 ,英文名: CC16 ELISA Kit
噻呋酰胺(分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%) Thifluzamide 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,96% 大鼠β細(xì)胞素(BTC)ELISA檢測試劑盒Ratbetacellulin,BTCELISAKit 96T/48T
(標(biāo)準(zhǔn)品) Tsumacide 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 人低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒 Human LDL-IC ELISA Kit
特丁津(標(biāo)準(zhǔn)品) Terbuthylazine 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 Ratnuclearfactor-κBp65,NF-κBp65ELISAKit大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
三特丁基膦(1.0 M in ) Tri-tert-butylphosphine 質(zhì)量規(guī)格:1.0 M in FITC標(biāo)記二抗POD轉(zhuǎn)換試劑盒10
吡螨胺(標(biāo)準(zhǔn)品) Tebufenpyrad 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 MouseSerumamyloidA,SAAELISA試劑盒小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
萘乙酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Naphthaleneacetamide 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA試劑盒 ,英文名: sAIL ELISA Kit
噻蟲啉(標(biāo)準(zhǔn)品) Thiacloprid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠FMS樣酪激酶3配體(Flt3L)ELISA檢測試劑盒RatFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKit 96T/48T
三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%) Tricyclazol solution 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2% 人低密度脂蛋白(LDL)試劑盒 Human low density lipoprotein,LDL ELISA Kit
超級(jí)雜交液(芯片)組織PKCη激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞PKCη激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織PKCζ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細(xì)胞PKCζ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織PKCε激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。