詳細介紹
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
PCR DNA Labeling Kit | 5次 | GOY-F10167 |
產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品特點: 1.一站式,本試劑盒提供經(jīng)過優(yōu)化的試劑,不需要用戶自己摸索。。 2. 足夠10次50μl體系的常規(guī)PCR(用于制備標(biāo)記反應(yīng)的模板和設(shè)置對照反應(yīng))和5次50μl體系的標(biāo)記反應(yīng)。 3.一次標(biāo)記可以得到μg級的雙鏈DNA探針或約700ng的單鏈DNA探針,足夠多次雜交實驗用。 4. 既可用于制備雙鏈探針,也可以用于單鏈探針。 5. 90604A需自備含標(biāo)記核苷酸的dNTP,90604B和90604C分別含和標(biāo)記的底物。自備的標(biāo)記包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。 6. 本產(chǎn)品得到的探針參入率一般為4-5%(每100個核苷酸中有4-5個將帶有非同位素標(biāo)記),有效降低了空間阻礙,檢測效果佳。 7.可以用于Southern和Northern Blot、原位雜交、菌落和斑點印跡雜交等分析。 注:標(biāo)記專用PCR Mix不含dNTP。 儲存條件:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。 |
DNA提取流程圖:
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔抗腦組織抗體elisa試劑盒 兔抗腦組織抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔抗腦組織抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔抗腦組織抗體試劑盒、兔抗腦組織抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione 中文名: 分子式:C19H18N2O3S
兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISAKit 5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde 231278-84-5 中文名: 分子式:C26H17ClFN3O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione 144809-28-9 中文名: 分子式:C19H18N2O3S
兔抗單核細胞抗體(AMA)ELISAKit 5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal 中文名: 分子式:C21H32O3 度:98.0%
兔巨噬細胞炎癥蛋白-5(rabbit MIP-5) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 5-Hydroxymethylfurfural 中文名:5-羥甲基糠醛 分子式:C6H6O3
(R)-(-)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙(>99.0%(GC)) (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) HumanAlpha1Aichymoypsin,AACTELISA試劑盒人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(S)-(+)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙(>99.0%(GC)) (S)-(+)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 植物β1,3D葡聚糖合成酶活性比色法定量檢測試劑盒20
N-(2-羧基苯甲酰)-(-)-10,2-樟腦磺內(nèi)酰胺(>98.0%(HPLC)(T)) N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISAKit小鼠血清總補體(CH50)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
對茴香酸(>99.0%(GC)(T)) p-Anisic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(T) 小鼠可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)ELISA試劑盒 ,英文名: sTLR9/sCD289 ELISA Kit
9-蒽羧酸(>97.0%(GC)(T)) 9-Anthracenecarboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T) 大鼠雙氫(DHT)ELISA檢測試劑盒RatDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T
5-(4-甲氧羰基)-10,15,2-三卟吩(>90.0%(HPLC)) 5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(HPLC) 人蛋白酶3抗體(PR3Ab)試劑盒 Human Proteinase 3 Aibody,PR3Ab ELISA Kit
2-萘甲酰氯(>98.0%(GC)(T)) 2-Naphthoyl Chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) Ratoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISAKit大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4-二甲基氨基肉桂醛(>98.0%(T)) 4-Dimethylaminocinnamaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) GILLS蘇木素復(fù)染試劑盒50
2,3-萘二羧酸酐(>95.0%(GC)(T)) 2,3-Naphthalenedicarboxylic Anhydride 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T) Mousesolublemyosinheavychain2,sMHC-2ELISA試劑盒小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2,4,6-三(十五氟庚基)-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 2,4,6-3(pentadecafluoroheptyl)-1,3,5-triazine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 小鼠可溶性Toll樣受體4(sTLR4)ELISA試劑盒 ,英文名: sTLR4 ELISA Kit
PCR法DNA探針標(biāo)記試劑盒細胞IRAK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織IKKβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞IKKβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織IKKα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞IKKα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)