詳細介紹
產(chǎn)品詳細介紹:
Fluo-2 早是由Roger Tsien 博士發(fā)明的鈣離子指示劑Fluo 系列之一,目前,Fluo-3 和Fluo-4 已成熟商品化。然而,Fluo-2 在細胞內(nèi)比Fluo-4 要更明亮,主要可能是由于大部分細胞對FLuo-2 的加載能力要高于FLuo-4。 Fluo-3 成像涉及到鈣離子信號通路的多個方面,Fluo-3 經(jīng)常應用在流式細胞術上,如螯合劑光活化、第二信使、神經(jīng)遞質(zhì)以及細胞水平的藥理篩選。Fluo-3 在這些應用里之所以能大量運用主要是由于其幾個重要特性:Fluo-3 可以被氬離子激光器488nm 激發(fā),并在與Ca2+結合后,發(fā)射熒光很明亮的熒光信號。Fluo-4 是Fluo-3 以兩個氟原子取代氯原子的類似物,這一微小的結構變化使得Fluo-4探針在488nm 激發(fā)光下的熒光信號得到增強,信號穩(wěn)定持續(xù),可以應用于共聚焦顯微鏡、流式細胞儀、微孔板讀數(shù)儀。 Fluo-2、Fluo-3 和Fluo-4 在與Ca2+結合后熒光增強,與紫外激發(fā)的探針fura-2 和indo-1 不同,不會發(fā)生光譜漂移。熒光光密度在與Ca2+結合后,增強至少100 倍。 |
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
Fluo-4, AM | 200μg | GOY-F10176 |
DNA提取流程圖:
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
兔固(ALD)ELISA試劑盒 5-Aminoindazole 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 度:98.0%
兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit 4-Hydroxysapriparaquinone 120278-25-3 中文名: 分子式:C20H26O4 度:% 關鍵詞: 紅根草; 二萜醌; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體elisa試劑盒 兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標志物CTX-2抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 81053-14-7 中文名: 分子式:C9H14O4 度:% 關鍵詞: 千里光; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔骨橋素(OPN)ELISA試劑盒 4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide 154127-42-1 中文名: 分子式:C10H16N2O6S3 度:98.0% 關鍵詞:
兔骨堿性0酸酶(rabbit BALP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one 中文名: 分子式:C11H7ClN4O2
內(nèi)消旋-2,3-二巰基丁二酸(>98.0%(T)) meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 英文名稱RatAdiponectinELISAKit大鼠脂聯(lián)素(ADT)規(guī)格:96T/48T
吡哆醛-L-谷二鉀鹽[藥物研究配體] Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt 質(zhì)量規(guī)格:藥物研究配體 肝脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20
吡哆醛-L-異亮鉀鹽[藥物研究配體] Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium Salt 質(zhì)量規(guī)格:藥物研究配體 ELISAKitFFA人游離脂肪酸規(guī)格:48T/96T
1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷四鹽酸鹽(>98.0%(N)) 1,4,7,10-Tetraazacyclododecane Tetra 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N) 小鼠顆粒酶M(GZMM)ELISA試劑盒 ,英文名: GZMM ELISA Kit
己二酸雙(2-乙基己基)酯(>98.0%(GC)) Bis(2-ethylhexyl) Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 人促有絲分裂因子(MF/MPF)ELISA檢測試劑盒Humanmaturationpromotingfactor,MF/MPFELISAKit 96T/48T
3,4-苯并芘(升華精制品)(>95.0%(GC)) 3,4-Benzopyrene (purified by sublimation) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒 Rat thrombomodulin,TM ELISA Kit
雙(苯乙酰)二硫化物(>98.0%(HPLC)) Bis(phenylacetyl) Disulfide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 英文名稱RatadiponectinELISAKit大鼠脂聯(lián)素(adiponectin)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
苯并紅紫4B[pH指示劑] Benzopurpurine 4B 質(zhì)量規(guī)格:pH指示劑 高多糖/酚植物線粒體DNA萃取試劑盒10/20
五甲氧基紅(>98.0%(HPLC)) Pentamethoxy Red 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) ELISAKitFEP人游離原卟啉規(guī)格:48T/96T
苯甲基橙(>95.0%(W)) Benzyl Orange 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(W) 小鼠顆粒酶K(GZMK)ELISA試劑盒 ,英文名: GZMK ELISA Kit
Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-4, AM組織CASEIN KINASE 2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞CASEIN KINASE 2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織CASEIN KINASE 1δ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞CASEIN KINASE 1δ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織CASEIN KINASE 1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。