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          上海谷研實業(yè)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>探針標記及檢測>>5mg細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)

          細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)

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          • 細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)

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          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 型號 5mg
          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-22 11:17:37瀏覽次數(shù):368

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 GOY-F10185
          應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
          細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)公司正*的各種產(chǎn)品真菌/酵母胱硫醚-β-合成酶(Cystathionine-β-synthase;CBS)活性比色法定量檢測試劑盒
          植物胱硫醚-β-合成酶(Cystathionine-β-synthase;CBS)活性比色法定量檢測試劑盒
          細胞胱硫醚-β-裂解酶(cystathionine β-lyase;CBL)活性比色法定量檢測試劑盒
          組織胱硫醚-β-裂

          詳細介紹

          下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

          中文名稱

          英文名稱

          產(chǎn)品規(guī)格

          貨號

          細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA   SE)

          Carboxyfluorescein   diacetate, succinimidyl ester

          5mg

          GOY-F10185

          產(chǎn)品詳細介紹:

          CFDA SE 的全稱為Carboxyfluorescein   diacetate, succinimidyl ester,分子式為C29H19NO11,分子量為557.47。CFDA SE可以通透細胞膜,進入細胞后可以被細胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSECFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng),并標記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時,即可充分標記細胞。被CFDA SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)個月。CFSE標記細胞的熒光非常均一,比以前使用的其它細胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一,并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均勻。

          由于CFDA SE標記細胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定,每分裂一次子代細胞的熒光會減弱一半,這樣通過流式細胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細胞,分裂一次的細胞(1/2的熒光強度),分離兩次的細胞(1/4的熒光強度),分裂三次的細胞(1/8的熒光強度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細胞。

          CFDA SE標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。常用于淋巴細胞的增殖檢測,也可以用于成纖維細胞、NK細胞等其它細胞的增殖檢測,甚至還可以用于細菌增殖的檢測。

          儲存:-20℃,避光,有效期6個月。

          DNA提取流程圖:

          QQ截圖20220414142532.png

          實驗步驟
          (1)
          實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
          (2)
          取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
          (3)65
          水浴3-10 min,期間混勻2-3
          (4)
          加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
          (5)
          取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
          (6)
          加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
          (7)10,000rpm,4
          離心20min
          (8)
          棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
          (9)
          ::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
          (10)
          2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
          (11)12,000rpm,4
          離心20 min
          (12)
          棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
          (13)
          200ulDEPC處理水溶解
          (14)
          用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
          (
          在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
          操作步驟:
          1.
          勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
          b.
          單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染。
          c
          .細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
          2
          .將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
          3
          .可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
          5.
          每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
          6. 2-8
          10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
          7.
          把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
          8. 2-8
          10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
          兔白介素-1RA(rabbit IL-1ra)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  4-Benzyl L-aspartate  中文名:L-天冬-4-芐酯  分子式:C11H13NO4  度:98.0%

          兔白介素-1a(rabbit IL-1a)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate  7536-58-5  中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-天冬-4-芐酯  分子式:C16H21NO6  度:98.0%   

          兔白介素-18(rabbit IL-18)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝  4-Benzyl L-aspartate  2177-63-1  中文名:L-天冬-4-芐酯  分子式:C11H13NO4  度:98.0%   

          兔白介素17elisa試劑盒   兔白介素17試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   兔白介素17試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔白介素17試劑盒、兔白介素17 elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  4-Biphenylcarboxylic acid  92-92-2  中文名:4-苯甲酸  分子式:C13H10O2 

          兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒     4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate  3479-47-8  中文名:N-芐氧羰基-L-天冬-4-芐脂  分子式:C19H19NO6
          蛋白酶K(進分)  Proteinase K  質(zhì)量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma分裝 Ratplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          蛋白酶K(Sigma)  Proteinase K  質(zhì)量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma原裝 GST(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升

          胰凝乳蛋白酶抑制劑  Chymostatin  質(zhì)量規(guī)格:進分 Mousethrombin-aithrombincomplex,TATELISA試劑盒小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          亮抑蛋白酶肽(進口)  Leupeptin   質(zhì)量規(guī)格:≥95%,進口半硫酸鹽 小鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒 ,英文名: ACA-IgA ELISA Kit

          胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制劑  Pepstatin A microbial  質(zhì)量規(guī)格:≥90%,進分 大鼠C(VC)ELISA檢測試劑盒RatVitaminC,VCELISAKit 96T/48T

          巖藻糖;L-巖藻糖  L-(-)-Fucose   質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR 人蛋-R-亞砜還原酶 B2,線粒體(MSRB2/CBS-1/MSRB/CGI-131)試劑盒 Human MSRB2 ELISA kit

          果膠酶  Pectinase  質(zhì)量規(guī)格:3U/g Ratplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          β-(70u/ml液體)  beta-Amylase  質(zhì)量規(guī)格:BR,70u/ml液體 GST釣餌(PULLDOWN)檢測試劑盒2/5

          β-(酶活5萬粉末)  beta-Amylase  質(zhì)量規(guī)格:BR,酶活5,粉末 Mousethrombospondin1,TSP-1ELISA試劑盒小鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

          DNA,脫氧核糖核酸酶Ⅰ  Deoxyribonuclease  質(zhì)量規(guī)格:≥2000KU/mg protein,(牛胰) 小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒 ,英文名: AMA ELISA Kit
          細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE)細胞SPHK2激酶活性熒光定量檢測試劑盒

          組織SPHK1激酶活性熒光定量檢測試劑盒

          細胞SPHK1激酶活性熒光定量檢測試劑盒

          組織SPHK激酶總活性比色法定量檢測試劑盒(510

          細胞SPHK激酶總活性比色法定量檢測試劑盒(510


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