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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | GOY-F10204 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 | 主要用途 | 僅供科研使用 |
（KALLIKREIN）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞血紅素氧合酶（HEME OXYGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織血紅素氧合酶（HEME OXYGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
體外非細(xì)胞系統(tǒng)血紅素氧合酶（HEME OXYGENASE）活性比色法定量檢測(cè)
（KALLIKREIN）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞血紅素氧合酶（HEME OXYGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織血紅素氧合酶（HEME OXYGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
體外非細(xì)胞系統(tǒng)血紅素氧合酶（HEME OXYGENASE）活性比色法定量檢測(cè)
詳細(xì)介紹
DNA提取流程圖：
下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
iFluor 488 phalloidin | 300T | GOY-F10204 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
本品為iFluor 488標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽，可發(fā)出高亮度、光穩(wěn)定的綠色熒光，染色反應(yīng)特異性強(qiáng)，對(duì)比性高，具有比Actin抗體更好的染色效果，適合用作F-actin的定性和定量檢測(cè)。iFluor 488 鬼筆環(huán)肽染色與用于細(xì)胞分析的其他熒光染色*兼容，包括熒光蛋白、納米晶體和其他iFluor偶聯(lián)物（包含iFluor偶聯(lián)二抗）。另外，經(jīng)本品結(jié)合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學(xué)特性。且本品的結(jié)合沒有物種差異性，適用性廣泛。本品以1000×儲(chǔ)存液形式（溶于DMSO）提供。 鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）是一種來源于毒蕈類鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）的環(huán)狀七肽毒素，以高親和力（Kd= 20 nM）選擇性結(jié)合于絲狀肌動(dòng)蛋白F-actin，而不會(huì)與單體肌動(dòng)蛋白G-actin結(jié)合，通常用來標(biāo)記組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞體系中的F-actin，從而對(duì)F-actin進(jìn)行定性和定量分析。另外，鬼筆環(huán)肽衍生物也以相近的親和力結(jié)合于大小纖維，無論是動(dòng)植物來源的肌肉細(xì)胞或非肌肉細(xì)胞，按照每一個(gè)肌動(dòng)蛋白亞基約與一個(gè)鬼筆環(huán)肽分子的計(jì)量比結(jié)合。且非特異性結(jié)合幾乎可忽略，染色區(qū)域和非染色區(qū)域辨識(shí)度非常明顯。因此，鬼筆環(huán)肽衍生物特別適合替代肌動(dòng)蛋白（Actin）抗體進(jìn)行相關(guān)研究。另外鬼筆環(huán)肽衍生物很小，直徑約12-15?，分子量＜2000 Daltons，未標(biāo)記肌動(dòng)蛋白（Actin）的許多生理特性都得以維持，比如，同肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白如肌球蛋白，原肌球蛋白，DNase I等仍能發(fā)生反應(yīng)；鬼筆環(huán)肽標(biāo)記的纖維絲仍可穿透固相肌球蛋白基質(zhì)；以及甘油抽提的肌纖維標(biāo)記后仍可收縮等。 鬼筆環(huán)肽（Phalloidin）的結(jié)合阻止絲狀肌動(dòng)蛋白（微絲）的解離，穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu)，從而破壞微絲的聚合-去聚合的動(dòng)態(tài)平衡。此特性使得肌動(dòng)蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度（CC）降至＜1μg/mL，因此，可用作一種聚合促進(jìn)劑。此外，鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。 分子量：～1900 大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)：493/517nm 溶解性：溶于DMSO 儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥，有效期一年 |
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí)，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒 4-Amino-N-methylbenzamide 6274-22-2 中文名：4-氨基-N-甲酰胺 分子式：C8H10N2O
蘇木素染液 Fast HE tissues and exfoliated cells of dye 4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine 145783-14-8 中文名： 分子式：C7H7Cl2N3O2S
松弛素-2 英文名稱： Human Relaxin-2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： RLN-2 4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene 中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪 分子式：C28H18N2O2 度：98.0%
四硼酸 5kg 4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane 中文名： 分子式：C11H11NO2 度：98.0%
四甲基聯(lián) 5g 4-(Phenylthio)benzyl alcohol 中文名： 分子式：C13H12OS 度：98.0%
L-賴鹽酸鹽 H-Lys-OH.HCl 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 大鼠酶(CA)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratcarbonicanhydrase,CAELISAKit 96T/48T
L-鳥鹽酸鹽 L-Ornithine mono 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人單皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgG)試劑盒 Human herpes simplexvirus Ⅰ+Ⅱ(HSVⅠ+Ⅱ)aibody(IgG)ELISA kit
L-天門冬 L-Aspartic acid 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR ratProstaglandinF,PG-FELISAKit大鼠前列F(PGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L-天門冬(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Aspartic acid 質(zhì)量規(guī)格：>99%(T),標(biāo)準(zhǔn)品 HepatitisBvirusRFLP基因分析試劑盒20
L-半胱胺酸鹽酸鹽無水物 L-Cysteine ，anhydrous 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒小鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
羧甲司坦;S-羧甲基-L-半胱 Carbocistein;S-Carboxymethyl-L-cysteine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠抗促甲狀受體抗體(Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： Ab ELISA Kit
S-芐基-L-半胱 S-Benzyl-L-cysteine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA檢測(cè)試劑盒RatEndotheliallipase,ELELISAKit 96T/48T
L-谷鹽酸鹽 L-Glutamic acid 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 人單胺氧化酶(MAO)試劑盒 Human monoamine oxidase,MAO ELISA Kit
N'-硝基-L-精(L-NNA) Nω-Nitro-L-arginine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR RatProstaglandinF2α,PGF2αELISAKit大鼠前列F2α(PGF2α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Nα-苯甲酰-L-精 Nalpha-Benzoyl-L-arginine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Hexamer(隨機(jī)引物)(200納克/微升)100微升
iFluor 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(綠色)細(xì)胞基質(zhì)金屬（MMP）原位明膠酶譜法（in situ zymography）熒光染色試劑盒
冰凍切片基質(zhì)金屬（MMP）原位明膠酶譜法（in situ zymography）熒光染色試劑盒
細(xì)胞/組織蛋白（基質(zhì)金屬）樣品制備試劑盒
（CM transferrin -zymography電泳分析試劑盒（MMP7）
基質(zhì)金屬（MMP）羧甲基轉(zhuǎn)鐵蛋白
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
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