詳細(xì)介紹
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
本系列探針是對活細(xì)胞中的酸性區(qū)室(如溶酶體、頂體)pH值進(jìn)行檢測的一類熒光探針,該類探針的染色具有向酸性,可通過質(zhì)子化作用在酸性細(xì)胞器內(nèi)累積。該類探針的這種向酸性可解除染料的熒光淬滅性,使其所發(fā)射的熒光強(qiáng)度更強(qiáng)。因此,本系列探針隨著細(xì)胞器的酸化程度其熒光強(qiáng)度呈pH依賴型(向酸)增強(qiáng)。 本品是一種用于測定溶酶體pH值的比率測量型探針,也是系列探針中的一種pH依賴型顯示雙激發(fā)和雙發(fā)射波長的熒光探針,該探針在中性環(huán)境中產(chǎn)生藍(lán)色熒光,但當(dāng)所處環(huán)境變?yōu)槠嵝詴r,則發(fā)射黃色熒光。本品以溶于無水DMSO的1mM儲存液形式提供。 分子式:C20H22N4O3 分子量:366.4188 Ex/Em:329?440 pKa:~4.2 儲存條件:-20℃干燥,避免反復(fù)凍融,有效期6個月 |
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
Lysosome Yellow/Blue DND-160 (PDMPO) | 50μl | GOY-F10234 |
DNA提取流程圖:
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
人組織蛋白酶Kelisa試劑盒 人組織蛋白酶K試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人組織蛋白酶K試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白酶K試劑盒、人組織蛋白酶K elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 3',5'-Anhydrothymidine 中文名:3',5'-脫水胸苷 分子式:C10H12N2O4 度:98.0%
人組織蛋白酶K(cath-K)ELISAKit Thiamphenicol 中文名:甲砜 分子式:C12H15Cl2NO5S
人組織蛋白酶Delisa試劑盒 人組織蛋白酶D試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人組織蛋白酶D試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白酶D試劑盒、人組織蛋白酶D elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 3',5'-Anhydrothymidine 中文名:3',5'-脫水胸苷 分子式:C10H12N2O4
人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒 3',5'-Anhydrothymidine 7481-90-5 中文名:3',5'-脫水胸苷 分子式:C10H12N2O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人組織蛋白酶B(cath-B)ELISA試劑盒 3',5'-Anhydrothymidine 7481-90-5 中文名:3',5'-脫水胸苷 分子式:C10H12N2O4
尿酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Uric acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA檢測試劑盒Humanβ-lactamaseELISAKit 96T/48T
度米芬 Domiphen bromide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR 大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)抗體試劑盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1(AT1R)aibody ELISA Kit
甜菜堿,一水 Betaine monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 英文名稱RatInhibinAELISAKit大鼠抑制素A(INHA)規(guī)格:96T/48T
萘酚AS-D-乙酸酯 Naphthol AS-D acetate 質(zhì)量規(guī)格:0.98 待測樣品處理試劑盒20
鋅原卟啉 Zinc protoporphyrin 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分 ELISAKitChE人乙酰酯酶規(guī)格:48T/96T
美伐他汀,康百汀 Mevastatin 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠角質(zhì)轉(zhuǎn)谷酰胺酶(TGM1)ELISA試劑盒 ,英文名: TGM1 ELISA Kit
美伐他汀(標(biāo)準(zhǔn)品) Mevastatin 質(zhì)量規(guī)格:>95%,標(biāo)準(zhǔn)品,用于含量測定 人β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA檢測試劑盒Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISAKit 96T/48T
6-氨基青霉烷酸 6-Aminopenicillanic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)試劑盒 Rat angiotensin Ⅱ receptor type 1,AT1R ELISA Kit
L-天酶,酶 Asparaginase 質(zhì)量規(guī)格:BR,>250IU/MG 英文名稱RatInhibinAELISAKit大鼠抑制素A(INHA)規(guī)格:96T/48T
N-芐氧羰基-L-丙 N-Carbobenzyloxy-L-alanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 合酶(glaminesyhetase)活性酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20
溶酶體黃/藍(lán)色熒光探針組織樣品組織C(CATHEPSIN C)活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞組織C(CATHEPSIN C)活性比色法定量檢測試劑盒
組織樣品組織H(CATHEPSIN H)活性比色法定量檢測試劑盒
細(xì)胞組織H(CATHEPSIN H)活性比色法定量檢測試劑盒
組織樣品組織D(CATHEPSIN D)活性比色法定量檢測試劑盒
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。