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          上海谷研實業(yè)有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>探針標(biāo)記及檢測>>50μl溶酶體黃/藍(lán)色熒光探針

          溶酶體黃/藍(lán)色熒光探針

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          • 溶酶體黃/藍(lán)色熒光探針

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          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 型號 50μl
          • 品牌 R&D/美國
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-22 12:30:58瀏覽次數(shù):339

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 貨號 GOY-F10234
          應(yīng)用領(lǐng)域 化工 主要用途 僅供科研使用
          溶酶體黃/藍(lán)色熒光探針公司正*的各種產(chǎn)品組織樣品組織D(CATHEPSIN D)活性熒光定量檢測試劑盒
          細(xì)胞組織H(CATHEPSIN H)活性熒光定量檢測試劑盒
          組織樣品組織H(CATHEPSIN H)活性熒光定量檢測試劑盒
          細(xì)胞組織S(CATHEPSIN S)活性熒光定量檢測試劑盒
          組織樣品組織S(CATHEPSIN S)活性熒光定量檢測試劑盒

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

          本系列探針是對活細(xì)胞中的酸性區(qū)室(如溶酶體、頂體)pH值進(jìn)行檢測的一類熒光探針,該類探針的染色具有向酸性,可通過質(zhì)子化作用在酸性細(xì)胞器內(nèi)累積。該類探針的這種向酸性可解除染料的熒光淬滅性,使其所發(fā)射的熒光強(qiáng)度更強(qiáng)。因此,本系列探針隨著細(xì)胞器的酸化程度其熒光強(qiáng)度呈pH依賴型(向酸)增強(qiáng)。

          本品是一種用于測定溶酶體pH值的比率測量型探針,也是系列探針中的一種pH依賴型顯示雙激發(fā)和雙發(fā)射波長的熒光探針,該探針在中性環(huán)境中產(chǎn)生藍(lán)色熒光,但當(dāng)所處環(huán)境變?yōu)槠嵝詴r,則發(fā)射黃色熒光。本品以溶于無水DMSO1mM儲存液形式提供。

          分子式:C20H22N4O3

          分子量:366.4188

          Ex/Em329?440

          pKa:~4.2

          儲存條件:-20℃干燥,避免反復(fù)凍融,有效期6個月

          下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

          中文名稱

          英文名稱

          產(chǎn)品規(guī)格

          貨號

          溶酶體黃/藍(lán)色熒光探針

          Lysosome   Yellow/Blue DND-160 (PDMPO)

          50μl

          GOY-F10234

           

          DNA提取流程圖:
          QQ截圖20220414142532.png
          實驗步驟
          (1)
          實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
          (2)
          取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
          (3)65
          水浴3-10 min,期間混勻2-3
          (4)
          加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
          (5)
          取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
          (6)
          加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
          (7)10,000rpm,4
          離心20min
          (8)
          棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
          (9)
          ::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
          (10)
          2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
          (11)12,000rpm,4
          離心20 min
          (12)
          棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
          (13)
          200ulDEPC處理水溶解
          (14)
          用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
          (
          在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
          人組織蛋白酶Kelisa試劑盒   人組織蛋白酶K試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人組織蛋白酶K試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白酶K試劑盒、人組織蛋白酶K elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  3',5'-Anhydrothymidine  中文名:3',5'-脫水胸苷  分子式:C10H12N2O4  度:98.0%

          人組織蛋白酶K(cath-K)ELISAKit     Thiamphenicol  中文名:甲砜  分子式:C12H15Cl2NO5S 

          人組織蛋白酶Delisa試劑盒   人組織蛋白酶D試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人組織蛋白酶D試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人組織蛋白酶D試劑盒、人組織蛋白酶D elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。     3',5'-Anhydrothymidine  中文名:3',5'-脫水胸苷  分子式:C10H12N2O4 

          人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒     3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名:3',5'-脫水胸苷  分子式:C10H12N2O4  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

          人組織蛋白酶B(cath-B)ELISA試劑盒     3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名:3',5'-脫水胸苷  分子式:C10H12N2O4
          尿酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Uric acid  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA檢測試劑盒Humanβ-lactamaseELISAKit 96T/48T

          度米芬  Domiphen bromide  質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR 大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)抗體試劑盒 Rat angiotensin receptor type 1(AT1R)aibody ELISA Kit

          甜菜堿,一水  Betaine monohydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 英文名稱RatInhibinAELISAKit大鼠抑制素A(INHA)規(guī)格:96T/48T

          萘酚AS-D-乙酸酯  Naphthol AS-D acetate  質(zhì)量規(guī)格:0.98 待測樣品處理試劑盒20

          鋅原卟啉  Zinc protoporphyrin  質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分 ELISAKitChE人乙酰酯酶規(guī)格:48T/96T

          美伐他汀,康百汀  Mevastatin  質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 小鼠角質(zhì)轉(zhuǎn)谷酰胺酶(TGM1)ELISA試劑盒 ,英文名: TGM1 ELISA Kit

          美伐他汀(標(biāo)準(zhǔn)品)  Mevastatin  質(zhì)量規(guī)格:>95%,標(biāo)準(zhǔn)品,用于含量測定 人β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA檢測試劑盒Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISAKit 96T/48T

          6-氨基青霉烷酸  6-Aminopenicillanic acid  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)試劑盒 Rat angiotensin receptor type 1,AT1R ELISA Kit

          L-天酶,  Asparaginase  質(zhì)量規(guī)格:BR,>250IU/MG 英文名稱RatInhibinAELISAKit大鼠抑制素A(INHA)規(guī)格:96T/48T

          N-芐氧羰基-L-  N-Carbobenzyloxy-L-alanine  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 合酶(glaminesyhetase)活性酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20
          溶酶體黃/藍(lán)色熒光探針組織樣品組織CCATHEPSIN C)活性比色法定量檢測試劑盒

          細(xì)胞組織CCATHEPSIN C)活性比色法定量檢測試劑盒

          組織樣品組織HCATHEPSIN H)活性比色法定量檢測試劑盒

          細(xì)胞組織HCATHEPSIN H)活性比色法定量檢測試劑盒

          組織樣品組織DCATHEPSIN D)活性比色法定量檢測試劑盒
          操作步驟:
          1.
          勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
          b.
          單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養(yǎng)板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNADNA污染。
          c
          .細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
          2
          .將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
          3
          .可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
          5.
          每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
          6. 2-8
          10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
          7.
          把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
          8. 2-8
          10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。


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