詳細介紹
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
Universal Whole Genome Amplification Kit; | 25次 | GOY-F10240 |
產(chǎn)品詳細介紹:
本產(chǎn)品是用于基因組DNA擴增全基因組的試劑盒,可以方便、簡單、快速、經(jīng)濟的得到穩(wěn)定產(chǎn)量的基因組DNA擴增樣品。 產(chǎn)品特點: 基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和鏈取代能力。 可以擴增基因組達上萬倍,具有高產(chǎn)量和高保真性的特點。 可使用各種來源的樣品,包括全血,干血,發(fā)根,口腔粘膜刮液培養(yǎng)細胞,真菌和病毒等。 操作簡便快捷,恒溫(30℃)反應,無須PCR儀即可實現(xiàn)擴增。 產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗,包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構(gòu)建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析(片段差異,微衛(wèi)星差異,SNP,STR)等。 本產(chǎn)品適用于純化好的基因組DNA。 本產(chǎn)品只能用于科研。 保存:-20℃,有效期1年。 產(chǎn)品組成: 組分 規(guī)格 WGA溶液A 250μL 2×WGA溶液B 300μL phi29 DNA聚合酶(10U/μL) 25μL 本產(chǎn)品是高效cDNA合成和PCR擴增的一步法RT-PCR試劑盒,用于以RNA為模板,通過特異引物合成cDNA之后,在DNA聚合酶的作用下通過PCR技術(shù)檢測目標基因的含量。 產(chǎn)品特點: 實現(xiàn)一管式完成RT-PCR反應,避免樣品交叉污染。 反應產(chǎn)物加入Loading Buffer后可以直接電泳檢測。 本產(chǎn)品包含了cDNA合成以及PCR反應所必須的酶和反應體系,優(yōu)化的Buffer體系大程度的減少了反轉(zhuǎn)錄酶對擴增反應的抑制,提高了反應整體的敏感性。 本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的RT-PCR,只能用于科研目的。 保存:-20℃保存,有效期一年。 |
DNA提取流程圖:
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
人轉(zhuǎn)鐵蛋白(F)ELISA試劑盒 3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile 143612-79-7 中文名: 分子式:C13H13ClN2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA試劑盒 3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile 143612-79-7 中文名: 分子式:C13H13ClN2
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISAKit 3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one 85175-59-3 中文名: 分子式:C15H18ClNO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人轉(zhuǎn)錄因子 英文名稱: Human Engrailed-2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EN-2 3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 87691-87-0 中文名: 分子式:C11H13N3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human ATF6 (Activating anscription Factor 6) ELISA Kit 2''-O-Acetylsprengerinin C 1220707-33-4 中文名: 分子式:C46H72O17
Fmoc-L-賴鹽酸鹽 Fmoc-Lys-OH·HCl 質(zhì)量規(guī)格:0.98 Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氧化白藜蘆(標準品) Oxyresveratrol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 小鼠膠原交聯(lián)(PYD)ELISA試劑盒 ,英文名: PYD ELISA Kit
氧化白藜蘆 Oxyresveratrol 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA檢測試劑盒Ratamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit 96T/48T
乙酰化白藜蘆(標準品) Acetyl-resveratrol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)試劑盒 Human MAPKAPK3 ELISA Kit
乙酰化白藜蘆 Acetyl-resveratrol 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR RatsolubleIerleukin2recepter,IL-2sRELISAKit大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴 Fmoc-Lys(Mtt)-OH 質(zhì)量規(guī)格:0.98 Humancytomegalovirus(HCMV)RFLP基因分析試劑盒20
芴甲氧羰基-O-芐基-L-蘇 Fmoc-Thr(Bzl)-OH 質(zhì)量規(guī)格:0.98 Mouseβ-catenin,β-catELISA試劑盒小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N'-Fmoc-L-賴 Fmoc-Lys-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 ,英文名: PY ELISA Kit
Fmoc-天門冬-β-芐酯 Fmoc-L-aspartic acid β-benzyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98% 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒RatBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 96T/48T
芴甲氧羰基-L-天冬-1-叔丁酯 Fmoc-Asp(OH)-OtBu 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)試劑盒 Human ACTN-3 ELISA Kit
通用型全基因組擴增試劑盒細胞組織L(CATHEPSIN L)活性熒光定量檢測試劑盒
體液鈣(CALPAIN)活性熒光定量檢測試劑盒
組織鈣(CALPAIN)活性熒光定量檢測試劑盒
細胞鈣(CALPAIN)活性熒光定量檢測試劑盒
組織γ分泌酶(γ-SECRETASE)活性熒光淬滅法定量檢測試劑盒