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詳細(xì)介紹
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
DNA Shuffling Kit | 10次 | GOY-F10259 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
DNA Shuffling即DNA分子的體外同源重組，它是一種分子水平上的定向進(jìn)化(directed evolution)技術(shù)，它以一個(gè)或多個(gè)基因?yàn)槠鹗疾牧希ㄟ^先隨機(jī)斷裂成小片段，再進(jìn)行互為模板和引物的PCR(無外加引物)，后再進(jìn)行常規(guī)PCR(外加引物)等處理，后得到含有大量DNA重組突變的PCR產(chǎn)物。 產(chǎn)品特點(diǎn)： 1.即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板，無需單獨(dú)準(zhǔn)備各成分。 2.操作手冊(cè)經(jīng)過優(yōu)化，1-2天即可完成，節(jié)省大量優(yōu)化時(shí)間。 3.本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。 儲(chǔ)存條件：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限一年。 |
DNA提取流程圖：
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí)，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
人整合素連接激酶1elisa試劑盒 人整合素連接激酶1試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 人整合素連接激酶1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人整合素連接激酶1試劑盒、人整合素連接激酶1 elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 2-Aminothiazol-4-acetic acid 中文名：2-氨基噻唑-4-乙酸 分子式：C5H6N2O2S
人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒 2-Aminophenyl phenyl sulfone 4273-98-7 中文名：2-氨基二苯砜 分子式：C12H11NO2S 度：98.0%
人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISAKit 2-Aminophenyl phenyl sulfide 1134-94-7 中文名：2-氨基二苯硫醚 分子式：C12H11NS 度：98.0%
人整合素αⅤβ3(IegrinαⅤβ3)ELISA試劑盒 2-Aminophenyl phenyl sulfone 4273-98-7 中文名：2-氨基二苯砜 分子式：C12H11NO2S
人真胰島素(TI)ELISA試劑盒 2-Aminophenyl phenyl sulfide 中文名：2-氨基二苯硫醚 分子式：C12H11NS 度：98.0%
DL-苦杏仁酸 DL-Mandelic acid 質(zhì)量規(guī)格：AR Humanai-gangliosideaibody,GM1ELISA試劑盒人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
抗壞血酸；C Ascorbic acid；vitamin C 質(zhì)量規(guī)格：AR;>99% 植物可溶性酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(acidinvease)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒(液泡)20
C(標(biāo)準(zhǔn)品) Ascorbic acid；vitamin C 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 HumanVitaminDReceptor,VDRELISAKit人D受體(VDR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺 Octadecanamine 質(zhì)量規(guī)格：AR 小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒 ，英文名： PTH ELISA Kit
山梨酸 Sorbic acid 質(zhì)量規(guī)格：AR,99% 大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit 96T/48T
盧立康唑 Luliconazole 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人穿孔素/成孔蛋白(PRF1/PFP)試劑盒 Human PRF1/PFP ELISA Kit
5-硝基-1,10-菲咯啉;5-硝基鄰菲啰啉 5-Nitro-1,10-phenanthroline 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR RatsolubleToll-likereceptor6,sTLR-6ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鐵冬青酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Rotundic acid 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 INSULIN蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25
酚藍(lán)鈉 Bromophenol blue salt 質(zhì)量規(guī)格：AR Peanagglinin,PNAELISA試劑盒花生凝集素(PNA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
百里香酚蘭鈉 Thymol blue salt 質(zhì)量規(guī)格：AR 小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA 試劑盒
DNA Shuffling試劑盒細(xì)胞磷酸腺苷脫氨酶（AMPD）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
血液蘋果酸脫氫酶（MDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織蘋果酸脫氫酶（MDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞蘋果酸脫氫酶（MDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
通用型蘋果酸脫氫酶（MDH）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
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