詳細介紹
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Rat ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱: Rat ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
Janus Green B 詹納斯綠B 1g 瓶
糖原PAS染色液試劑盒(過碘酸-雪夫染色液試劑盒) 100ml×4 盒
D-(+)-Cellobiose 纖維二糖 5g 瓶
Indole-3-butyricacid(IBA) 吲哚-4-丁酸(水溶) 5g 瓶
Q-Sepharose HP Q-瓊脂糖凝膠 HP 100ml 瓶
PEG 4000 聚乙二醇 4000 500g 瓶
Naringin 柚皮苷 10g 瓶
Benzyltrimethylammonium chloride 芐基*基氯化銨 100g 瓶
8-Hydroxyquinoline sulfate 8-羥基喹啉硫酸鹽 25g 瓶
大龍移液器 1000-5000ul 支
1.5ml離心管,10盒/箱 500支 盒
50MM有機濾膜(50張/盒) 0.22um 盒
L-Arginine L-精氨酸 74-79-3 200mg
1-Deoxynojirimycin 脫氧野尻霉素 19130-96-2 5mg
Tranilast 曲尼司特 53902-12-8 100mg
Gallic acid trimethyl ether 3,4,5-*氧基苯甲酸 118-41-2 20mg
Lactose 乳糖 63-42-3 100mg
Cis-Anethol 茴香腦 104-46-1 20mg
(+)-Catechin hydrate (+)-兒茶素 225937-10-0 20mg
Daphnoretin 西瑞香素 2034-69-7 20mg
Glucosyl-vitexin 牡荊素葡萄糖苷 76135-82-5 20mg
Liquiritigenin 甘草素 578-86-9 20mg
Paeoniflorin 芍藥苷 23180-57-6 20mg
Schisantherin A 五味子酯甲 58546-56-8 20mg
Vincamine 長春胺 1617-90-9 20mg
1×PBS (pH7.2-7.4) (細胞培養(yǎng)級) 500ml 瓶
RPMI Medium 1640(不含酚紅,谷氨酰胺 丙酮酸鈉) 500ml 瓶
蛋白質(zhì)定量
10×麗春紅 10ml 瓶
封閉用驢血清(凍干粉) 10ml 瓶
兔抗HRP 10mg 支聚乳酸英文名(EN):Polylactic acid,Mw ~60,000CAS No.:26100-51-6規(guī)格(SP):1G類別(Key):通用試劑
3-甲氧基-4-羥基苯...英文名(EN):4′-Hydroxy-3′-methoxyacetophenone,98%CAS No.:498-02-2規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
乙二胺四三鈉英文名(EN):EDTA,3Na,≥98.0%CAS No.:150-38-9規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
甲硫醇鈉鹽英文名(EN):Sodium thiomethoxide,95%CAS No.:5188/7/8規(guī)格(SP):1G類別(Key):通用試劑
3-乙酰脫氧瓜萎鐮菌醇英文名(EN):3-Acetyldeoxynivalenol,98%CAS No.:50722-38-8規(guī)格(SP):1MG類別(Key):通用試劑
9-氨基吖啶鹽酸鹽一...英文名(EN):9-Aminoacridine hydrochloride monohydr...CAS No.:52417-22-8規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
鹽酸鹽英文名(EN):3-Pyridylacetic acid hydrochloride,98%CAS No.:6419-36-9規(guī)格(SP):1G類別(Key):通用試劑
2-羰基丁酸鈉鹽英文名(EN):Sodium 2-oxobutyrateCAS No.:2013-26-5規(guī)格(SP):1G類別(Key):通用試劑
鞘磷脂英文名(EN):Sphingomyelin,≥97.0%CAS No.:85187-10-6規(guī)格(SP):25MG類別(Key):通用試劑
N-乙?;?4-啶酮英文名(EN):N-Acetyl-4-piperidoneCAS No.:32161-06-1規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
2-雷鎖辛英文名(EN):2-Methylresorcinol,≥98.0%CAS No.:608-25-3規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
四甘醇英文名(EN):TetraglycolCAS No.:31692-85-0規(guī)格(SP):100G類別(Key):通用試劑
玉米赤霉酮英文名(EN):ZearalanoneCAS No.:5975-78-0規(guī)格(SP):1MG類別(Key):通用試劑
大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)elisa試劑盒操作步驟2,3-二羥基苯甲酸英文名(EN):2,3-Dihydroxybenzoic acid,99%CAS No.:303-38-8規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
2-羥基苯英文名(EN):2-Hydroxyphenylacetic acid,99%CAS No.:614-75-5規(guī)格(SP):10G類別(Key):通用試劑
間甲氧基苯英文名(EN):3-Methoxyphenylacetic acid,≥99%CAS No.:763-10-0規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑