詳細(xì)介紹
產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
本品是由BaldStar Taq DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs(含dUTP)、UNG酶以及PCR穩(wěn)定劑等組成的PCR預(yù)混體系。使用本產(chǎn)品無需進(jìn)行繁雜的PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化過程,只需進(jìn)行簡單的條件摸 索即可輕松進(jìn)行多重PCR反應(yīng)。 ??本產(chǎn)品所含的BaldStar Taq DNA Polymerase是經(jīng)化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)酶,可以有效 減少PCR反應(yīng)初期因引物錯(cuò)配而產(chǎn)生的非特異擴(kuò)增。*的緩沖體系,使多重PCR反 應(yīng)所有的引物都能有效延伸,無需額外優(yōu)化。此MasterMix中還包含GC Enhancer,有 助于實(shí)現(xiàn)“困難"模板(比如,高GC含量的模板)的高效擴(kuò)增。本產(chǎn)品運(yùn)用dUTP-UNG 防污染系統(tǒng),可有效去除了PCR產(chǎn)物的殘留污染,大大降低了由于擴(kuò)增產(chǎn)物污染而導(dǎo) 致的假陽性。UNG酶在PCR循環(huán)中的預(yù)變性步驟即可被滅活,因此不會(huì)影響新的含dU 堿基PCR產(chǎn)物的形成。 ??本品可有效防止PCR產(chǎn)物的殘留污染,適用于防污 染多重PCR反應(yīng),比如微衛(wèi)星分析、基因分型和SNP檢測等。 |
下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號(hào) |
Multiplex PCR MasterMix(UNG) | 1ml | GOY-F10309 |
DNA提取流程圖:
實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
可溶性ENG/sCD105 英文名稱: Human soluble Endoglin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ENG/sCD105 Paroxetine 中文名:鹽酸 分子式:C19H21ClFNO3
顆粒體蛋白Granulin 英文名稱: Granulin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GRN 3-O-Acetylandrostenone hydrazone 122914-94-7 中文名:3-O-乙酰基雄酮腙 分子式:C21H32N2O2
抗緊張素‖受體︱型自身抗體 英文名稱: Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: AT1R-AA 3-Amino-4-methylbenzamide 中文名:3-氨基-4-甲酰胺 分子式:C8H10N2O 度:98.0%
抗緊張素‖受體︱型自身抗體 英文名稱: Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies 英文縮寫: AT1R-AA 規(guī)格: 48T/96T Ophiopogonin D 中文名:麥冬皂苷D 分子式:C44H70O16
抗酸性0酸酶(SACP)試劑盒(比色法) Repaglinide 135062-02-1 中文名: 分子式:Repaglinide 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
氨力農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品) Amrinone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitGP-ⅡbⅢa人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa規(guī)格:48T/96T
角叉菜膠;卡拉膠 Carrageenan 質(zhì)量規(guī)格:BR 小鼠肌球蛋白重鏈2(MYH2)ELISA試劑盒 ,英文名: MYH2 ELISA Kit
?;悄懰?/span>-3-硫酸酯二鈉鹽 Taurocholate-3-sulfate,di salt 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR 人胃泌素細(xì)胞抗體(GCA)ELISA檢測試劑盒Humangasincellaibody,GCAELISAKit 96T/48T
FLAG peptide FLAG peptide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠細(xì)胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)試劑盒 Rat Cytokeratin 18-M30,CK 18-M30 ELISA kit
十一烯酸鋅 Zinc undecylenate 質(zhì)量規(guī)格:>98% 英文名稱RatCardiolipinIgA(ACAIgA))Elisakit大鼠心0脂抗體CardiolipinIgA(ACAIgA)規(guī)格:96T/48T
羽扇豆鹼(標(biāo)準(zhǔn)品) lupanine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 過氧亞硝基陰離子解構(gòu)劑FeTMPyPpeachloride1毫升
普盧利;普利 Prulifloxacin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR ELISAKitPBP/CXCL7人血小板堿性蛋白規(guī)格:48T/96T
普盧利;普利(標(biāo)準(zhǔn)品) Prulifloxacin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌球蛋白重鏈1(MYH1)ELISA試劑盒 ,英文名: MYH1 ELISA Kit
5-HIAA;5-羥基吲哚-3-乙酸(血清素代謝物) 5-HIAA 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,進(jìn)分 人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)ELISA檢測試劑盒Humanfibronectioelatedaigen,FRAELISAKit 96T/48T
頭孢地嗪酸;頭孢地嗪酸 Cefodizime acid 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR 大鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3)試劑盒 Rat iercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit
防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)細(xì)胞單胺氧化酶A型(MAO-A)活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒
體液單胺氧化酶(MAO)總活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒
組織單胺氧化酶(MAO)總活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒
細(xì)胞單胺氧化酶(MAO)總活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒
體液單胺氧化酶B型(MAO-B)活性熒光定量檢測試劑盒
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞,每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí),上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機(jī)相,上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相,進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。