詳細介紹
雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱: Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結果時乘以相應的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
兔抗羊IgG(免疫血清) 0.5ml 支
SABC(小鼠/兔IgG)-POD kit 100-200T 盒
50×TAE 緩沖液 500ml 瓶
通用引物 ITS5 (10uM) 250ul 支
MRS肉湯 250g 瓶
L-Cysteine hydrochloride anhydrous L-鹽酸半胱氨酸 25g 瓶
[I125] Human HDL I125放射性標記高密度脂蛋白 300uCi 瓶
SOD 超氧化物岐化酶(來源牛紅細胞) 15KU 瓶
Linezolid 利奈唑酮 5g 瓶
Evans Blue 埃文斯藍 1g 瓶
Hoechst 33342染色液(即用型) 10ml 瓶
Solar Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555) 5 mg 支
兩性電解質pH3-10 40% 12ml 瓶
Pig Bile salt 豬膽鹽 25g 瓶
HPD600大孔吸附樹脂 500g 瓶
8-苯胺-1-萘磺酸 8-Anili-naphthalenesulfonic acid-ANSA 25g 瓶
Syringaldehyde 丁香醛 5g 瓶
4-Aminobenzoic acid 對氨基苯甲酸 25g 瓶
PPO 2,5-二苯基噁唑 5g 瓶
稱量紙 75mm×75mm 100張-包 包
(直徑)13mm水系濾器 0.45um 個
5ml注射器 國產(chǎn) 1支 袋
L-Phenylalanine L-苯丙氨酸 63-91-2 200mg
Levodopa 左旋多巴 59-92-7 20mg
Epinephrine hydrochloride 鹽酸腎上腺素 329-63-5 100mg
Methyl eugenol 甲基丁香酚 93-15-2 20mg
黑木耳多糖 20mg 6-((2-((4-(2,4-Dichlorophenyl)-5-(4-methyl-1H-imidazol-2-yl)pyrimidin-2-yl)amino)ethyl)amino)nicotinonitrile; CT99021 EZSolution CHIR99021, Sterile-Filtered
AdoMet SAM disulfate p-toluenesulfonate; SAMe S-Adenosyl-L-methionine disulfate tosylate
Z-Val-Phe-CHO; Carbobenzoxy-valinyl-phenylalaninal; Calpain Inhibitor III MDL 28170
L-Threoascorbic acid, Antiscorbutic factor, Vitamin C L-Ascorbic acid
5-[2,4-Bis[(3S)-3-methyl-4-morpholinyl]pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-2-methoxybenzenemethanol AZD8055
(2Z) -2-Cyano-N-(2,5-dibromophenyl)-3-hydroxy-2-butenamide LFM-A13
D-( Chloramphenicol
3,5-Bis[(4-methylphenyl)methylene]-4-piperidone hydrochloride DUB Inhibitor, NSC-632839
雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒實驗方法Ethyl (3-methyl-6-(4-methyl-3-(methylsulfonamido)phenyl)-[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-8-yl)carbamate Bromosporine
β-Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced form, (Reduced Coenzyme-I) disodium salt; β-DPNH, β-NADH, DPNH NADH, disodium salt
T20 (PBS) Blocking Buffer EZBlock T20 (PBS) Blocking Buffer