雞乙酰乙酸檢測(cè)(ACAC)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Chicken Acetoacetic acid,ACAC ELISA Kit       檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱：Chicken Acetoacetic acid,ACAC ELISA Kit   
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
雞乙酰乙酸檢測(cè)(ACAC)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
雞乙酰乙酸檢測(cè)(ACAC)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
雞乙酰乙酸檢測(cè)(ACAC)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。 
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說(shuō)明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問，可和所購(gòu)經(jīng)銷商， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
雞乙酰乙酸檢測(cè)(ACAC)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

75cm2正方斜口不透氣培養(yǎng)瓶   5個(gè) 包

10%過硫酸銨 1ml 支

膜再生液    500ml   瓶

雞IgG干粉  10mg    支

兔抗人IgG（免疫血清）   0.5ml   支

anti-GST Tag Rabbit Polyclonal antibody 100ul   瓶

Agarose 瓊脂糖  10g 瓶

TaqMan One Step RT-qPCR Kit 200T    支

Bost aurusdomesticus 牛膽粉 100g    瓶

Uracil 尿嘧啶   25g 瓶

L-Glutathione reduced 還原型谷胱甘肽    10g 瓶

Pepsin 1:10000 胃蛋白酶1:10000  25g 瓶

Betamethasone 倍他米松  100mg   瓶

Coomassie brilliant blue G-250 考馬斯亮藍(lán)G-250  10g 瓶

醋酸洋紅染色液  100ml   瓶

熒光素  1 g 支

N-acetyl-beta-d-glucosamine N-乙酰-D-氨基葡萄糖 25g 瓶

酸和鹽     

ECH Sepharose 4B 羧基-瓊脂糖凝膠 4B 25mL    瓶

TRIS    5kg 瓶

Trans-4-Hydroxycinnamic acid 反-對(duì)香豆酸    5g  瓶

Benzyltriethylammonium chloride 芐基三乙基氯化銨    100g    瓶

Mineraloil 礦物油(液體石蠟) 1000ml  瓶

包埋盒      個(gè)oxopentyl]amino]phenyl]amino]thioxomethyl]-4-（1，1-dimethylethyl）-benzamide； Tenovin-6

JWH 018 （solution） （10 mg）  （1-pentyl-1H-indol-3-yl）-1-naphthalenyl-methanone； AM678； JWH 018 （solution）

4-Methylbenzamide oxime （1 g） N-hydroxy-4-methyl-benzenecarboximidamide； p-Toylamideoxime； 4-Methylbenzamide oxime

Bisindolylmaleimide V （5 mg）  3，4-di-1H-indol-3-yl-1-methyl-1H-pyrrole-2，5-dione； Ro 31-6045|BIM V； Bisindolylmaleimide V

Geldanamycin （1 mg）   13R-hydroxy-8S，14S，19-trimethoxy-4，10，12S，16R-tetramethyl-3，20，22-trioxo-2-azabicyclo[16。3。1]docosa-1（21），4E，6E，10E，18-pentaen-9S-yl， carbamate； NSC 12275Geldanamycin

13，14-dihydro-15-keto-tetranor Prostaglandin F1α （100 ug）   9α，11α-dihydroxy-15-oxo-2，3，4，5-tetranor prostanoic acid； 13，14-dihydro-15-keto-tetranor Prostaglandin F1α

Aspalatone （5 mg） 2-（acetyloxy）-2-methyl-4-oxo-4H-pyran-3-yl-benzoic acid ester； Acetylsalicylic Acid Matol ester； Aspalatone

11β-Misoprostol （1 mg）   9-oxo-11。beta。，16-dihydroxy-16-methyl-prost-13E-en-1-oic acid， methyl ester； 11β-Misoprostol

Prostaglandin E2 （1 mg）   9-oxo-11。alpha。，15S-dihydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； Dinoprostone|PGE2； Prostaglandin E2

20-hydroxy Prostaglandin E2 （1 mg）    9-oxo-11α，15S，20-trihydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 20-hydroxy PGE2； 20-hydroxy Prostaglandin E2

雞乙酰乙酸檢測(cè)(ACAC)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 Prostaglandin F2α 1，11-lactone （5 mg）   9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid， 1，11-lactone； PGF2α 1，11-lactone； Prostaglandin F2α 1，11-lactone

15（R）-15-methyl Prostaglandin F2α （50 mg）  9。alpha。，11。alpha。，15R-trihydroxy-15-methyl-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid； 15（R）-15-methyl PGF2α； 15（R）-15-methyl Prostaglandin F2α