詳細介紹
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Chicken Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱: Chicken Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實驗方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
糖蛋白胨培養(yǎng)液/糖蛋白胨肉湯/Lactose Peptone Broth飲用水中總大腸菌群多管發(fā)酵法檢驗250克國產(chǎn)/進口
UMR-106(大鼠骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
乙基紫疊氮鈉肉湯/EVA肉湯/EVA Broth用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
RN-c, 大鼠質(zhì)神經(jīng)元
HPAC(人胰腺腺泡上)5×106cells/瓶×2
NCI-H23(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
人直腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
中國藍薔薇酸瓊脂250克國產(chǎn)/進口
Ca Ski(人宮頸上細胞)5×106cells/瓶×2
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞)5×106cells/瓶×2
MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion
RWPE1(人前列腺上細胞)5×106cells/瓶×2
IMR-32(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株)5×106cells/瓶×2
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞英文名稱:DCS
Bcap-37(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠成年表角質(zhì)形成層細胞*培養(yǎng)基100mL
Poly-L-Lysine Solutiona(5mg/ml)規(guī)格:1ml
人外周血白細胞*培養(yǎng)基100mL
M9肉湯/M9 BrothBR250克國產(chǎn)/進口
人卵巢透明細胞細胞英文名稱:ES-2
超級瓊脂/Super AgarBR250克國產(chǎn)/進口
人 B 淋巴母細胞英文名稱:HMy2.CIR PPARγ (human recombinant) FP Assay Reagent (5 ea) PPARγ (human recombinant); PPARγ (human recombinant) FP Assay Reagent
Cell-Based Assay Cyclosporin A (50 ul) Cell-Based Assay Cyclosporin A
Hexadecyl Methyl Glycerol (50 mg) 1-O-hexadecyl-2-O-methyl-sn-glycerol; 1-O-hexadecyl-2-O-methyl-sn-Glycerol; Hexadecyl Methyl Glycerol
7-hydroxycoumarinyl Arachidonate (5 mg) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl ester; Umbelliferyl Arachidonate; 7-hydroxycoumarinyl Arachidonate
SMase Acid Solution (1 ea) SMase Acid Solution
Glycogen Hydrolysis Buffer (8 ml) Glycogen Hydrolysis Buffer
N-(3-pyridyl)-Indomethacin amide (5 mg) N-(3-pyridyl)-1-(4-chlorobenzoyl)-5-methoxy-2-methyl-1H-indole-3-acetamide; N-3PyIA; N-(3-pyridyl)-Indomethacin amide
3,4-Dihydroxyphenyl ethanol (5 mg) 4-(2-hydroxyethyl)-1,2-benzenediol; 3-Hydroxytyrosol|Ba2774; 3,4-Dihydroxyphenyl ethanol
雞白介素17(IL-17)elisa試劑盒實驗方法Clasto-Lactacystin β-lactone (50 ug) 1R-[1S-1hydroxy-2-methylpropyl]-4R-methyl-6-oxa-2-azabicyclo[3。2。0]heptane-3,7-dione; β-Clastolactacystin|Omuralide; Clasto-Lactacystin β-lactone
Nitrate Reductase (LDH method) (1 ea) Nitrate Reductase (LDH method)
ODQ (10 mg) 1H-[1,2,4]oxadiazolo[4,3-a]quinoxalin-1-one; ODQ
DAF-2 diacetate (500 ug) 2-(3,6-diacetyloxy-4,5-diamino-9H-xanthen-9-yl)-benzoic acid; 4,5-Diaminofluorescein diacetate; DAF-2 diacetate