詳細(xì)介紹
人膀胱上皮永生化細(xì)胞;SV-HUC-1*操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人膀胱上皮永生化細(xì)胞;SV-HUC-1*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。
產(chǎn)品名稱 | 人膀胱上皮永生化細(xì)胞;SV-HUC-1* |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱 人膀胱上皮永生化細(xì)胞;SV-HUC-1*
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 這株細(xì)胞是正常膀胱組織用SV40病毒轉(zhuǎn)染建株的。 反復(fù)用非洲綠猴腎細(xì)胞平板測(cè)試檢測(cè)傳染性SV40的生成,結(jié)果都呈陰性。 脅迫(如曝露于化學(xué)試劑)下可能激活病毒。 ATCC還有一株化學(xué)轉(zhuǎn)化的成瘤細(xì)胞株,MC-SV-HUC T2,目錄號(hào)為CRL-9519。
培養(yǎng)條件 F12K 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 P(30+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人膀胱上皮永生化細(xì)胞;SV-HUC-1*運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問(wèn)題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
60604-100 DEPC 水 100mL
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60603-20 即用型藍(lán)白 T 載體 A 型 (T7-SP6,有 MCS) 20 次
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60602-50 柱式植物 DNAout 50 次
60602-50 柱式植物 DNAout 50 次
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60601-3 DNA UV 防護(hù)劑 3g
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60501-20 一管式拭子 DNAout 20 次
60501-20 一管式拭子 DNAout 20 次
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60501-100 一管式拭子 DNAout 100 次
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60408-50 通用洗柱液 50mL
60408-50 通用洗柱液 50mL
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60408-250 通用洗柱液 250mL
60408-250 通用洗柱液 250mL
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60408-100 通用洗柱液 100mL
60408-100 通用洗柱液 100mL
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60405-10 RNase-free DTT 溶液 ,1M 10mL
60405-10 RNase-free DTT 溶液 ,1M 10mL
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60404-100 超級(jí)培養(yǎng)基 100mL
60404-100 超級(jí)培養(yǎng)基 100mL
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60403-100 紅細(xì)胞裂解液 A 型 ( 核酸純化 ) 100mL
60403-100 紅細(xì)胞裂解液 A 型 ( 核酸純化 ) 100mL
60403-100 紅細(xì)胞裂解液 A 型 ( 核酸純化 ) 100mL
60402-30 超快非醇核酸沉淀劑 30 次
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60402-100 超快非醇核酸沉淀劑 100 次
60402-100 超快非醇核酸沉淀劑 100 次
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60401-250 RNase-free 75% 乙醇 250mL
60401-250 RNase-free 75% 乙醇 250mL
60401-250 RNase-free 75% 乙醇 250mL
60309-1.5 RNase A 溶液,2mg/mL 1.5mL
60309-1.5 RNase A 溶液,2mg/mL 1.5mL
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