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綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 320DM-EGFP價(jià)格售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。
詳細(xì)介紹
綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 320DM-EGFP價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，*進(jìn)口來(lái)源，*保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 320DM-EGFP價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 320DM-EGFP價(jià)格【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 320DM-EGFP價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣；多角形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 EGFP穩(wěn)定表達(dá)
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:5~1:10傳代；2~3天換液1次。
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 320DM-EGFP價(jià)格細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
90207-10 JM109 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10
90208-10 SURE 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10
90211-100 低載量 PCR 片段純化試劑盒 100 次
90211-50 低載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次
90212-100 高載量 PCR 片段純化試劑盒 100 次
90212-50 高載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次
90301-25 RNA 級(jí) Oligo(dT) 纖維素 25mg
90302-5 MgCl2溶液，25mM，PCR 級(jí) 5mL
90303-1 硅膠膜 DNA 離心吸附柱 ( 大提 ) 1套
90306A-100 胰酶消化液 ( 含 EDTA) 100mL
90306B-100 胰酶消化液 ( 無(wú) EDTA) 100mL
90307-100 青鏈霉素溶液 100mL
90308-25 親和硅烷 25mL
90309-100 紅細(xì)胞裂解液 B 型 ( 流式細(xì)胞分析用 ) 100mL
90311-100 Tricine 干粉，電泳級(jí) 100g
90313-250 TBE 電泳液 ,10× 250mL
90313-2500 TBE 電泳液 ,10× 2500mL
90314-50 柱式尿液 DNAout 50 次
90315-100 非凍型尿液 DNA 保存液 100mL
90315-15 非凍型尿液 DNA 保存液 15mL
90317-30 一站式 DNA 尿素 -PAGE 電泳套裝 30 次
90318-50 柱式 DNA 清除劑 50 次
90402-50 蛋白膠微量回收試劑盒 50 次
90403-5 蛋白膠中量回收試劑盒 5次
90404-50 柱式植物 RNAout 2.0 50 次
90407A-5 lambda(λ)DNA 5μg
90407B-5 lambda(λ)DNA 5μg
90407C-5 lambda(λ)DNA 5μg
90408-100 即用型熒光定量 PCR 試劑盒 100 次
90408-600 即用型熒光定量 PCR 試劑盒 600 次
90501-250 Tth DNA 聚合酶 250U
90502-200 AMV 逆轉(zhuǎn)錄酶 200U
90503-100 電泳級(jí)甘油 100mL
90504-10 XL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10
90505-10 BL21(DE3) 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10