詳細(xì)介紹
人腎癌Wilms細(xì)胞;G401價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人腎癌Wilms細(xì)胞;G401價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
人腎癌Wilms細(xì)胞;G401價(jià)格【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人腎癌Wilms細(xì)胞;G401價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞來源于一名3個(gè)月大的嬰兒的腎Wilms瘤,由于該類腫瘤分類的改變,經(jīng)Garvin等鑒定后發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞來源于腎橫紋肌樣瘤。該細(xì)胞分泌腎母細(xì)胞生長(zhǎng)因子(nephroblast growth factor,NB-GF)。
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,13;D13S317:9,14;D16S539:12;D18S51:14;D19S433:13,14;D21S11:31,32.2;D2S1338:18,24;D3S1358:16,18;D5S818:13;D7S820:11,14;D8S1179:13,14;FGA:24,27;TH01:8,9.3;TPOX:8,11;vWA:16;
同工酶
染色體 亞二倍體,XY
使用權(quán)限 A類
人腎癌Wilms細(xì)胞;G401價(jià)格細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
130568-1000 α-Tubulin 小鼠單抗 1000μL
130566-30 α-Actin 小鼠單抗 30μL
130566-1000 α-Actin 小鼠單抗 1000μL
130543-25 α2巨球蛋白 25Inh.U
CAS305-72-6 α- 酮戊二酸鈉 5g
CAS328-50-7 α- 酮戊二酸 5g
CAS5989-81-1 α- 乳糖 100g
CAS28166-41-8 α- 氰基 -4- 羥基肉桂酸 10g
CAS86-87-3 α -萘乙酸 5g
CAS9004-07-3 α- 糜蛋白酶 1g
CAS10016-20-3 α- 環(huán)狀糊精 250mg
CAS9000-85-5 α- 淀粉酶 250g
23-0840-1 Z-VAD-FMK(Caspase Inhibitor) 1mg
22-0620-5 Zinquin 乙酯 5mg
131280-250 Zetterqvist 固定液 250 mL
131223-250 Zenker 固定液 250 mL
140105-250 Zamboni 固定液 250 mL
130896-100 YPG 液體培養(yǎng)基 100mL
130897-100 YPDG 液體培養(yǎng)基 100mL
130895-100 YPD 液體培養(yǎng)基 100mL
12-194 Y2HGold 酵母菌種 1mL
140390-10 Y2HGold 酵母化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 10×100μL
12-193 Y187 酵母菌種 1mL
140389-10 Y187 酵母感受態(tài)細(xì)胞 10×100μL
12-263 Y1090 菌種 1mL
12-262 Y1089 菌種 1mL
140635-500 XTT 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒 500 次
140376-10 XL2-Blue 感受態(tài)細(xì)胞 10×100μL
12-260 XL1-Blue 菌種 1mL
90504-10 XL1-Blue 化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10