詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞;D61-18,IgA圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;D61-18,IgA圖片
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該雜交瘤細胞由湖南遠泰生物技術(shù)有限公司制備并提交,細胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗,可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
小鼠雜交瘤細胞;D61-18,IgA圖片細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
小鼠雜交瘤細胞;D61-18,IgA圖片質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
小鼠雜交瘤細胞;D61-18,IgA圖片操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
ELISA Kit for Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin (NGAL) 中性粒細胞明膠酶關(guān)聯(lián)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 進口、國產(chǎn) 規(guī)格: 48T/96T
ELISA Kit for Histone H2B (H2B) 組蛋白H2B(H2B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 進口、國產(chǎn) 規(guī)格: 48T/96T
ELISA Kit for Vitamin B9 (VB9) 維生素B9(VB9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 進口、國產(chǎn) 規(guī)格: 48T/96T
ELISA Kit for Osteonectin (ON) 骨粘連蛋白(ON)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 進口、國產(chǎn) 規(guī)格: 48T/96T
ELISA Kit for Osteonectin (ON) 骨粘連蛋白(ON)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 進口、國產(chǎn) 規(guī)格: 48T/96T
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ELISA Kit for Thrombospondin 1 (THBS1) 血小板反應蛋白(THBS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 進口、國產(chǎn) 規(guī)格: 48T/96T
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ELISA Kit for Myoglobin (MYO) 肌紅蛋白(MYO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 進口、國產(chǎn) 規(guī)格: 48T/96T
ELISA Kit for Prostaglandin H2 (PGH2) 前列腺素H2(PGH2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 進口、國產(chǎn) 規(guī)格: 48T/96T
ELISA Kit for Glycoprotein IIb/IIIa (GPIIb/IIIa) 血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GPⅡbⅢa)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 進口、國產(chǎn) 規(guī)格: 48T/96T
ELISA Kit for Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor (TAFI) 纖溶抑制因子(TAFI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 進口、國產(chǎn) 規(guī)格: 48T/96T
ELISA Kit for Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor (TAFI) 纖溶抑制因子(TAFI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 進口、國產(chǎn) 規(guī)格: 48T/96T
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