詳細(xì)介紹
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系源自一位患有橫紋肌肉瘤的1歲女孩的肌肉組織,由D.J. Giard建立。
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C6
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204圖片質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204圖片操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
Anti-CD137/TNFRSF9/FITC 熒光素標(biāo)記CD137抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CD133 antigen/PE 熒光素藻紅蛋白標(biāo)記兔抗人、大、小鼠和果蠅CD133抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
Anti-HVEM/TNFRSF14/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Syndecan-1/CD138/FITC 熒光素標(biāo)記多配體聚糖抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CD141/FITC 熒光素標(biāo)記凝血調(diào)節(jié)蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
Anti-VE-cadherin/CD144/VECD/FITC 熒光素標(biāo)記上皮型鈣粘附分子/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CD146(MCAN)/FITC 熒光素標(biāo)記抗黑色素瘤細(xì)胞粘付分子CD146抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CD158a/KIR2DL1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DL1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CD158b2/KIR2DL3/NKAT2a/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DL3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CD158D/KIR2DL4/G9P/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體2DL4抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 熒光素標(biāo)記NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204圖片小鼠脫碘酶(ID)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠乳頭瘤病毒18(HPV-18)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝