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詳細介紹
產(chǎn)品名稱：乳腺癌細胞;MDA-MB-468
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9795
細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常
儲存條件：2℃-8℃，避光儲存
運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞特性：
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二． 細胞處理：
1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項：
（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
PDK1(phospho Y373 + Y376) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Donkey human IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長基因1抗體 Egr-1 0.1ml
Goat human IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的羊抗人IgM 1ml
Factor H 英文名稱： 補體因子H抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-TBK1/NAK (Ser172) 磷酸化NF-κB活化激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Donkey human IgG/FITC 熒光素標(biāo)記驢抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
TIEG1/KLF10(TGF-beta inducible early response gene 1) TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
BTG2/TIS21 B細胞遷移基因2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh PDZD6 PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK6蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
CD10 濃縮液 0.1ml 進口分裝
Thyroid peroxidase 英文名稱： 甲狀腺過氧化物酶抗體 0.1ml
CK7 英文名稱： 細胞角蛋白7抗體 0.2ml
BTG2/TIS21 B細胞遷移基因2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rabbit Biotin 兔抗生物素抗體IgG 0.2ml
F1 protein (YERSINIA PESTIS) 英文名稱： 鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克隆抗體 0.1ml
人類白細胞抗原G/組織相容性白細胞抗原G抗體 HLA-G 0.1ml
HSP-90 Beta /HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記熱休克蛋白90β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RGS19(Ser151) 磷酸化G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 規(guī)格 0.1ml
pig IgM (親和純化) 豬IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 1mg
乳腺癌細胞;MDA-MB-468一葉秋堿 ，一葉萩堿石杉堿乙 通用型甜菜壞死黃脈?。?/span>Beet Necrotic Yellow Vein Virus； BNYVV）基因檢測試劑盒
遠志口山酮；遠志山酮III石松靈堿通用型越橘葉枯黃?。˙lueberry Leaf Scorch Virus；BLSV）基因檢測試劑盒
雷公藤定堿矢車菊素3-O-葡萄糖苷通用型黃瓜花葉?。–ucumber Mosaic Virus；CMV）基因檢測試劑盒
三正丁基十烷基氯化膦鼠李糖通用型葡萄扇葉病（Grapevine Fanleaf Virus；GFLV）基因檢測試劑盒
羅漢果皂苷ⅢA1鼠尾草酸通用型鳳仙花壞死斑?。↖mpatiens Necrotic Spot Virus；INSV）基因檢測試劑盒
羅漢果皂苷ⅡA2薯蕷皂苷通用型萵苣（包心）花葉?。↙ettuce Mosaic Virus；LMV）基因檢測試劑盒
羅漢果皂苷Ⅲe薯蕷皂苷纖維二糖苷通用型辣椒輕斑駁?。≒epper Mild Mottle Virus；PMMV）基因檢測試劑盒
羅漢果黃素薯蕷皂苷元通用型洋李痘皰病（Plum Pox Virus；PPV）基因檢測試劑盒
使用步驟：
一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。
（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。
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