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          上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>天然蛋白、重組蛋白>>真核蛋白/EP>>N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)真核蛋白

          N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)真核蛋白

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          • N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)真核蛋白

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          更新時(shí)間:2023-03-22 22:04:49瀏覽次數(shù):288

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Eukaryotic N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASA
          種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)真核蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:牛棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒Corynebacterium bovis牛鼻炎病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒Bovine Rhinitis Virus (BRV) RTPCR牛鼻炎病毒型PCR檢測(cè)試劑盒Bovine Rhinitis A Virus (BRAV)ARTPCR牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核suan檢測(cè)試劑盒牛鼻炎病毒型

          詳細(xì)介紹

          公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

          特點(diǎn):

          標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。

          酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。

          熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

          產(chǎn)品名稱:N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)真核蛋白   

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          英文名稱:Eukaryotic N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2)

          HNAC1; non-lysosomal ceramidase; Neutral ceramidase

          酶與激酶

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來(lái)源:真核表達(dá)

          宿主293F cell

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

          亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

          預(yù)測(cè)分子量:106.0kDa

          實(shí)際分子量:100kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

          片段與標(biāo)簽:Phe99~Ile780 with N-terminal His Tag and C-terminal Fc Region of Human IgG1

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 80%

          等電點(diǎn):7.2

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

          相關(guān)產(chǎn)品:
          硫酸酯酶2(SULF2)重組蛋白R(shí)ecombinant Pyruvate Carboxylase (PC)

          硫酸酯酶1(SULF1)重組蛋白R(shí)ecombinant Neuropathy Target Esterase (NTE)

          硫嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶(TPMT)重組蛋白R(shí)ecombinant Nicotinamide-N-Methyltransferase (NNMT)

          硫代硫酸鹽轉(zhuǎn)硫酶(TST)重組蛋白R(shí)ecombinant N-Acetylneuraminic Acid Synthase (NANS)

          圖片6.png

          標(biāo)簽選擇:

          親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。

          不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

          真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

          a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

          b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

          c.      無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

          d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

          e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

          f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

          g.      大量表達(dá)

          h.      親和純化

          i.        檢測(cè)和鑒定

          原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

          a.      選擇表達(dá)載體

          b.      密碼子優(yōu)化

          c.      基因合成/亞克隆

          d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

          e.      蛋白表達(dá)小試分析

          f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

          g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。

          h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

          GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)

            誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。

          操作步驟

          根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

          1、樣品前處理:

          a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

          b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。

          c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

          2、后處理:

          將裂解后

           的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

          MUC15產(chǎn)品名稱: 粘蛋白15抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          應(yīng)用類型: Other英文名稱: Human Ig Kappa light chain英文別名: Kappa Light Chain; IGKC; HCAK 1; HCAK1; Ig kappa chain C region; IGKC; Immuglobulin kappa constant; Immuglobulin kappa constant region; Immuglobulin kappa light chain; Kappa 1 immuglobulin light chain; Km; MGC111575; MGC62011; MGC72072; MGC88770; MGC88771; MGC88809; Human Ig/L-Chain Kappa; IGKC_HUMAN.

          ALPI產(chǎn)品名稱: 堿性磷suanmei(腸型)抗體產(chǎn)品別名: 腸道堿性磷suanmei; 腸堿性磷suanmei; 堿性磷suanmei,腸型; 腸型堿性磷suanmei;

          HDX產(chǎn)品名稱: 高度發(fā)散同源異型盒蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Horse, Rabbit

          ZDHHC-18產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白Zdhhc18抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse

          NUDT17產(chǎn)品名稱: NUDT17蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Cat

          phospho-MAP4K4 (Ser631)產(chǎn)品名稱: 絲裂原活化蛋白激meiMAP4K4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse, Rabbit

          CCDC134產(chǎn)品名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白134抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse

          EML1產(chǎn)品名稱: EML1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit

          SLC35F1產(chǎn)品名稱: 溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族35成員F1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
          N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)真核蛋白大鼠載脂蛋白C-II(APOC2)ELISAAPOC2載脂蛋白C-IIelisa檢測(cè)試劑盒Rat apolipoprotein C-II,APOC2 ELISA kit

          大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)ELISA試劑盒APOC1載脂蛋白C-Ielisa kitRat apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit

          大鼠載脂蛋白B-48(ApoB48)ELISA試劑盒ApoB48載脂蛋白B-48ELISA試劑盒Rat apolipoprotein B-48,ApoB48 ELISA kit

          大鼠載脂蛋白A1前體(Pre-Apo-A1)ELISA試劑盒Pre-Apo-A1載脂蛋白A1前體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat apolipoprotein A1 precursor,Pre-Apo-A1 ELISA kit

          大鼠游離甲狀腺激su(FT3)ELISA試劑盒FT3游離甲狀腺激suelisa檢測(cè)試劑盒Rat FT3 ELISA Kit


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