產(chǎn)品名稱:丙酮酸脫羧酶(PDC)測試盒規(guī)格
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測試方法:微量法、紫外分光光度法
貨號:YS-01S6474
測定意義
PDC主要存在于酵母中,是乙醇發(fā)酵的關(guān)鍵酶之一,催化丙酮酸脫羧生成乙醛。
測定原理:
PDC催化丙酮酸脫羧生成乙醛,添加乙醇脫氫酶(ADH)來進一步催化 NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+;NADH在340 nm有吸收峰,而NAD+沒有;通過測定340 nm光吸收下降速率,來計算PDC活性。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
特點:
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
STAT6 STAT6 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh phospho-c-Raf(Ser462) 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 規(guī)格 0.1ml
兔抗FITC純化抗體 1mg 國產(chǎn)
phospho-YES1(Tyr537) 英文名稱: 磷酸化原癌基因酪酸蛋白激酶Yes1抗體 0.1ml
DDX5 英文名稱: 三磷酸腺苷依賴解旋酶ddx5抗體 0.2ml
STAT6 STAT6 鼠單抗 (PE) Human
Endostatin 內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
氫鉀ATP酶通道蛋白抗體 Anti-ATP4B/H+K+ ATPase 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-EGFR (Tyr992) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
F10培養(yǎng)液(Ham) 250ml 國產(chǎn)
ZBT10 英文名稱: 鋅指蛋白ZBT10抗體 0.2ml
beta Defensin 1 英文名稱: 防御素β1/Defensin β1抗體 0.1ml
氫鉀ATP酶通道蛋白抗體 Anti-ATP4B/H+K+ ATPase 0.1ml
SARM1 英文名稱: SARM1蛋白抗體 0.2ml
EphB1+EphB2 英文名稱: 蛋白激酶受體B1+B2抗體 0.2ml
丙氨酰tRNA合成酶2抗體 Anti-AARS2 0.1ml
Anti-Wnt2B/FITC 熒光素標記信號通路Wnt2B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FoxO3a (Ser294) 磷酸化叉頭蛋白3A抗體 規(guī)格 0.1ml
CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
丙酮酸脫羧酶(PDC)測試盒規(guī)格正磷酸鐵(>98%,BR)異鼠李素-3-O-新橙皮苷 蛋白共沉淀分析試劑盒-LEPTIN
還原鐵粉(>98%,BC)紫蓳靈 /組織裂解懸液、血液、體液等蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒-LEPTIN
1-溴代異戊烷(>98%,BR)高麗槐素 FITC綠色熒光標記一抗
異佛爾酮(>98%,BR)秦皮苷TRITC紅色熒光光標記一抗
異(>98%,BR)奇任HRP標記一抗
異香草(>98%,BR)高良姜素通用載玻片制備試劑盒
異香草(標準品)比枯枯靈熒光顯微鏡基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)
衣康酸(>98%,BR)異槲皮苷熒光顯微鏡間接檢測試劑盒(含熒光二抗)