產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Active Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-23 08:44:09瀏覽次數(shù):309
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Active Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)活性蛋白 | Active Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
PLA2G7; PAF-AH; PAFAH; Lp-PLA2; LDL-PLA2; Platelet Activating Factor Acetylhydrolase,Plasma; Phospholipase A2,Group VII; LDL-associated phospholipase A2; Phospholipase A2, Lipoprotein Associated 酶與激酶 代謝通路 感染免疫 物種:Homo sapiens (Human,人) 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:7.1 應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
紅素氧合酶2(HO2)重組蛋白Recombinant Exosome Component 2 (EXOSC2)
黑色素瘤關(guān)聯(lián)ME20(ME20M)重組蛋白Recombinant Iduronidase Alpha L (IDUa)
核糖體蛋白S6激酶β2(RPS6Kb2)重組蛋白Recombinant Isocitrate Dehydrogenase 2, mitochondrial (IDH2)
核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kb1)重組蛋白Recombinant Protein Kinase, X-Linked (PRKX)
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
N ras + c Ha ras產(chǎn)品名稱: HRAS1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow
ADM2產(chǎn)品名稱: 中介su抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit
FOXL1產(chǎn)品名稱: FOXL1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse
Mesothelin產(chǎn)品名稱: 間皮su抗體交叉反應(yīng): Human
Tri-Methyl-Histone H3 (Lys79)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Rabbit
ATPase Na+/ K+ beta 2產(chǎn)品名稱: 鈉鉀ATPmei通道蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
Neurabin 2產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)組織特異性F肌動蛋白結(jié)合蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Sheep
GLUT1產(chǎn)品名稱: 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
T2R60產(chǎn)品名稱: 味覺受體蛋白家族2亞基60抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Bee
Calcipressin 1/DSCR 1產(chǎn)品名稱: 鈣調(diào)神經(jīng)磷suanmei調(diào)節(jié)蛋白1抗體(唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit, Sheep
脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)活性蛋白大鼠調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄肽elisa kitRat Cocaine And Amphetamine Regulated Transcript(CART)ELISA Kit
大鼠抗胰島細胞抗體(ICA)ELISA試劑盒ICA抗胰島細胞抗體ELISA試劑盒Rat Anti-Islet Cell Antibodies(ICA)ELISA Kit
大鼠節(jié)律晝夜蛋白2(PER2)ELISA試劑盒PER2節(jié)律晝夜蛋白2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat Period Circadian Protein 2(PER2)ELISA Kit
大鼠間羥腎上腺su(MN)ELISA試劑盒MN間羥腎上腺suelisa檢測試劑盒Rat Metanephrine(MN)ELISA Kit
大鼠緩激肽受體B2(BDKRB2)ELISA試劑盒BDKRB2緩激肽受體B2elisa kitRat Bradykinin Receptor B2(BDKRB2)ELISA Kit