詳細介紹
產品名稱:膀胱移行細胞癌;SW 780
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9955
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
URGCP/URG4/FITC 熒光素標記乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
克拉拉細胞蛋白(Clara細胞分泌蛋白)抗體 CC16 0.1ml
SNAP29 英文名稱: 突觸相關蛋白29抗體 0.2ml
EAF2 英文名稱: 睪酮調節(jié)細胞凋亡誘導和抑制基因抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Histone H1.4(Thr18) 磷酸化組蛋白H1.4抗體 規(guī)格 0.1ml
CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
ENA-78 human 人趨化因子 ENA-78Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
CMKLR1/CHEMR23 趨化樣因子受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NPHS2/Podocin 腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體 規(guī)格 0.1ml
Humanin ELISA Kit muman 人神經保護肽HN ELISA試劑盒 96T
TACC2 英文名稱: 轉化酸性卷曲含蛋白質2 0.2ml
C6orf52 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框52抗體 0.2ml
CMKLR1/CHEMR23 趨化樣因子受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse human IgG(3D3)/Bio 生物素標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
FBXO11 英文名稱: F-box蛋白相關蛋白11抗體 0.2ml
抗登革熱病毒抗體 Dengue Virus 0.2ml
PCNA/FITC 熒光素標記兔抗增值細胞核抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) 磷酸化酪激酶A抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse human IgG/FITC 熒光素標記小鼠抗人IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
膀胱移行細胞癌;SW 780凍切片組織FSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次人髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒,
石蠟切片組織FSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次小鼠脂蛋白相關磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒,
載玻片細胞FSH-BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒,
凍切片組織FSH-BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次大鼠球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒,
石蠟切片組織FSH-BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次大鼠血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒,
細胞FSH-BETA蛋白表達比色法定量檢測試劑盒10/50 次大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒,
細胞FSH-BETA蛋白表達熒光定量檢測試劑盒10/50 次大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒,
FSH-BETA蛋白表達西方雜交分析試劑盒5次豚鼠肝生長因子(HGF)ELISA試劑盒,
FSH-BETA蛋白共沉淀分析試劑盒5次山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白酶(AMPK)ELISA試劑盒,
FSH-BETA蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次葡萄糖銨培養(yǎng)基
細胞TSH-BETA蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒10/20次L-亮氨醇
載玻片細胞TSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次CBZ-L-天冬
凍切片組織TSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次FMOC-D-丙
石蠟切片組織TSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次假荊芥屬苷 Nepetin-7-glucoside
載玻片細胞TSH-BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次對-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。