化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant N-Acetylneuraminic Acid Phosphatase (N |
| 物種 | Mus musculus (Mouse，小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱：N-乙酰神經(jīng)氨酰酸磷酸酶(NANP)重組蛋白
物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)
英文名稱：Recombinant N-Acetylneuraminic Acid Phosphatase (NANP)
C20orf147; HDHD4; Haloacid Dehalogenase-Like Hydrolase Domain Containing 4; Neu5Ac-9-Pase
酶與激酶
物種：Mus musculus (Mouse，小鼠) 來源：原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位：：n/a 預(yù)測(cè)分子量：31.5kDa 實(shí)際分子量：33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書) 片段與標(biāo)簽：Met1~Val248 with N-terminal His Tag 緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點(diǎn)：5.7 應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
特點(diǎn)：
標(biāo)記：標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。
酶標(biāo)記：酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。
熒光標(biāo)記：熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。
相關(guān)產(chǎn)品：
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱβ(TOP2b)重組蛋白R(shí)ecombinant Neuraminidase (NEU)
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白R(shí)ecombinant Cytosolic Phospholipase A2 (PLA2G4)
脫支酶同源物1(DBR1)重組蛋白R(shí)ecombinant Prostaglandin D2 Synthase (PTGDS)
脫氧胸苷酸激酶(DTYMK)重組蛋白R(shí)ecombinant Solute Carrier Family 25 Member 20 (SLC25A20)
標(biāo)簽選擇：
親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試，條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶，蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白；表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后，表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。
SPINK7產(chǎn)品名稱: 食道相關(guān)基因抗體交叉反應(yīng): Human
LRRC23產(chǎn)品名稱: LRRC23蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit, Sheep
Kv2.2產(chǎn)品名稱: 電壓門控性鉀通道Kv2.2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit, Sheep
phospho-eIF4EBP1 (Ser65 + Thr70)產(chǎn)品名稱: eIF4E結(jié)合蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
CRISP10產(chǎn)品名稱: 富含半胱氨suan分泌蛋白10抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
GNA13交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse
MARVELD2產(chǎn)品名稱: MARVEL蛋白家族D2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, Monkey, Chimpanzee
ZMAT1產(chǎn)品名稱: 型鋅指蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Rabbit
RFESD產(chǎn)品名稱: RFESD蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
BRN3A產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體產(chǎn)品別名: Brn3α;
N-乙酰神經(jīng)氨酰酸磷酸酶(NANP)重組蛋白人Ⅱ型前膠原(PCⅡ)ELISA試劑盒PCⅡⅡ型前膠原elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Procollagen II(PCII)ELISA Kit
人Ⅱ類主要組織相容性復(fù)合體DQβ1(MHCDQβ1)ELISA試劑盒MHCDQβ1Ⅱ類主要組織相容性復(fù)合體DQβ1elisa檢測(cè)試劑盒Human Major Histocompatibility Complex Class II DQ Beta 1(MHCDQb1)ELISA Kit
人Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體G(MHCG)ELISA試劑盒MHCGⅠ類主要組織相容性復(fù)合體Gelisa kitHuman Major Histocompatibility Complex Class I G(MHCG)ELISA Kit
人Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體E(MHCE)ELISA試劑盒MHCEⅠ類主要組織相容性復(fù)合體EELISA試劑盒Human Major Histocompatibility Complex Class I E(MHCE)ELISA Kit
人Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體C(MHCC)ELISA試劑盒MHCCⅠ類主要組織相容性復(fù)合體Celisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Major Histocompatibility Complex Class I C(MHCC)ELISA Kit
操作步驟 ：
根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。
1、樣品前處理：
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管，然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品： 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
2、后處理：
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
化工儀器網(wǎng)