天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)真核蛋白公司正在出售的產(chǎn)品：尼帕病毒PCR檢測試劑盒Nipah Virus(NiV)RTPCR尼氏單孢子蟲PCR檢測試劑盒Haplosporidium nelsoniPCR尼氏單孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒Haplosporidium nelsoni擬桿菌屬通用PCR檢測試劑盒Bacteroides spp.PCR擬桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒Bacteroid

公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)真核蛋白   

物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Eukaryotic Aspartate Aminotransferase (AST)

cCAT; AAT; ASAT; SGOT; GOT1; Cysteine transaminase, cytoplasmic; Transaminase A; Aspartate Transaminase 1,Cytoplasmic; Glutamic-Oxaloacetic Transaminase 1,Soluble

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

肝膽病學(xué)

相關(guān)產(chǎn)品：
肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)重組蛋白Recombinant Sphingosine Kinase 1 (SPHK1)

肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(SLC25A20)重組蛋白Recombinant Histone Deacetylase 6 (HDAC6)

肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CRAT)重組蛋白Recombinant Histone Deacetylase 9 (HDAC9)

肉毒堿-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(CORT)重組蛋白Recombinant Ubiquitin Specific Peptidase 8 (USP8)

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試，條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測

　　誘導(dǎo)表達(dá)成功后，表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特點(diǎn)：

標(biāo)記：標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記：酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記：熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

MAK16/RBM13產(chǎn)品名稱: RNA結(jié)合蛋白MAK16抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

GPR34產(chǎn)品名稱: G蛋白偶聯(lián)受體34抗體交叉反應(yīng): Human

FKBPL交叉反應(yīng): human CD3/Cy5產(chǎn)品名稱: Cy5標(biāo)記小鼠抗人CD3單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian

CCL22產(chǎn)品名稱: 嗜suan粒細(xì)胞趨化蛋白22抗體交叉反應(yīng): Human

應(yīng)用類型: Methylated英文名稱: D.Aspartic acid英文別名: DL-Amisuccinic acid; D-Aspartic acid; D Aspartic acid.

MAGIX產(chǎn)品名稱: MAGIX蛋白抗體交叉反應(yīng): Human

TXLNG產(chǎn)品名稱: 脂多糖相關(guān)反應(yīng)蛋白5/γ-taxilin抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse

H3N2 Matrix Protein 2產(chǎn)品名稱: A型毒H3N2-M2蛋白抗體標(biāo)記: Unconjugated

CTNND2/delta 2 Catenin產(chǎn)品名稱: δ-連環(huán)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)真核蛋白小鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員2(TRPV2)ELISA試劑盒TRPV2轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Mouse Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily V, Member 2(TRPV2)ELISA Kit

小鼠真核翻譯起始因子2α激mei3(EIF2αK3)ELISA試劑盒EIF2αK3真核翻譯起始因子2α激mei3elisa檢測試劑盒Mouse Eukaryotic Translation Initiation Factor 2 Alpha Kinase 3(EIF2aK3)ELISA Kit

小鼠吲哚胺2,3-雙加氧mei2(IDO2)ELISA試劑盒IDO2吲哚胺2,3-雙加氧mei2elisa kitMouse Indoleamine-2,3-Dioxygenase 2(IDO2)ELISA Kit

小鼠胰島su樣蛋白6(INSL6)ELISA試劑盒INSL6胰島su樣蛋白6ELISA試劑盒Mouse Insulin Like Protein 6(INSL6)ELISA Kit

小鼠序列相似家族135成員B(FAM135B)ELISA試劑盒FAM135B序列相似家族135成員Belisa檢測試劑盒Mouse Family With Sequence Similarity 135, Member B(FAM135B)ELISA Kit