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產(chǎn)品名稱:海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)測(cè)試盒說(shuō)明書
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測(cè)試方法:微量法、紫外分光光度法
貨號(hào):YS-01S6703
測(cè)定意義
海藻糖是功能性低聚糖,具有非還原性、保濕性、熱酸穩(wěn)定性、抗凍結(jié)性等特性,是細(xì)胞在不良環(huán)境條件下產(chǎn)生的一種重要的抗逆應(yīng)激物之一,它對(duì)生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護(hù)作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麥芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的關(guān)鍵途徑之一。
測(cè)定原理:
TS催化麥芽糖產(chǎn)生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,通過(guò)葡萄糖氧化酶法測(cè)定葡萄糖含量,按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。
需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Anti-TRADD/FITC 熒光素標(biāo)記有死亡區(qū)的壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PS-1,Presennillin-1(CT) 早老素蛋白-1(S182)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
壞死因子受體相關(guān)因子1抗體 Anti-TRAF1 0.2ml
SorLA/LRP9 英文名稱: 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白9抗體 0.2ml
ER81 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ITGB3(Tyr785) 磷酸化整合素β3抗體 規(guī)格 0.1ml
PS-1,Presennillin-1(CT) 早老素蛋白-1(S182)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
OLFM1 peptide 嗅球蛋白1多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
Anti-Beta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ASK1(Ser83) 磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
Tubulin-Beta 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UQCRFS1 英文名稱: 質(zhì)子梯度調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.2ml
DNMBP 英文名稱: 動(dòng)力結(jié)合蛋白DNMBP抗體 0.2ml
Anti-Beta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
phospho-STAT6(Thr645) 英文名稱: 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體 0.1ml
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104 + Ser106) 英文名稱: 磷酸化雌受體α抗體 0.1ml
核突觸蛋白/突觸素-1抗體 Anti-α-Synuclein 0.1ml
Anti-TIMP-3/FITC 熒光素標(biāo)記金屬蛋白酶組織抑制因子-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-LRP6 (Ser1490) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格 0.1ml
NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1) 一氧化氮合成酶-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)測(cè)試盒說(shuō)明書去草凈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)土木香內(nèi)酯組織EPHB2酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
噻蟲啉(標(biāo)準(zhǔn)品)異土木香內(nèi)酯EPHB3酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
殺蟲環(huán)標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=7%,基體:甲)山姜素組織EPHB3酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%)小豆蔻明EPHB4酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)五味子甲素組織EPHB4酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
氟樂(lè)靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)五味子乙素FAK酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
草達(dá)津(標(biāo)準(zhǔn)品)丹參酮 IIA組織FAK酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)西貝母堿FES酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。