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          脫氧輔蛋白羥化酶/單加氧酶(DOHH)重組蛋白

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2023-03-22 21:04:09瀏覽次數(shù):302

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant Deoxyhypusine Hydroxylase/Monooxygenas
          物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          脫氧輔蛋白羥化酶/單加氧酶(DOHH)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:賴氨酰氧化mei樣蛋白1(LOXL1)重組蛋白英文名稱:Recombina Lysyl Oxidase Like Protein 1 (LOXL1)-5'-單磷suan脫氫mei2(IMPDH2)重組蛋白英文名稱:Recombina Inosine 5'-Monophosphate Dehydrogenase 2 (IMPDH2)磷suan

          詳細介紹

          蛋白表達及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

          2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

          4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
          公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          物種

          脫氧輔蛋白羥化酶/單加氧酶(DOHH)重組蛋白

          Recombinant Deoxyhypusine Hydroxylase/Monooxygenase (DOHH)

          Homo sapiens (Human,人)

          商品介紹:

          HLRC1; HEAT-Like(PBS Lyase)Repeat Containing 1; Deoxyhypusine dioxygenase; Deoxyhypusine monooxygenase

          酶與激酶

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來源:原核表達

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細胞定位::n/a

          預(yù)測分子量:27.4kDa

          實際分子量:28kDa(差異分析請參閱說明書)

          片段與標簽:Met1~Leu216 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 95%

          等電點:4.6

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

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          相關(guān)產(chǎn)品:

          酮戊二酸脫氫酶(OGDH)重組蛋白Recombinant Insulin Degrading Enzyme (IDE)

          銅伴侶超氧化物歧化酶重組蛋白Recombinant Oxidosqualene Cyclase (OSC)

          同源域相互作用蛋白激酶4(HIPK4)重組蛋白Recombinant Activin Receptor Like Kinase 1 (ALK1)

          同源域相互作用蛋白激酶3(HIPK3)重組蛋白Recombinant Protein Kinase C Alpha (PKCa)   

          操作步驟:

          Ⅰ 實體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個

          0.5 mL~1 mL

          5×106個

          0.2 mL~0.5 mL

          5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          注意事項:

          1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作 
          Phospho-HP1 gamma (Ser97+Ser99)產(chǎn)品名稱: 染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體產(chǎn)品別名: HP-1-γ; HP 1γ; HP-1γ; HP-1 γ; HP1γ; HP1 γ;

          Neurogenin3產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)元su3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Sheep

          UNC5C產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)突起生長誘導(dǎo)因子受體UNC5C抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

          HGF beta產(chǎn)品名稱: 細胞生長因子β抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse

          phospho-TEM8 (Tyr382)產(chǎn)品名稱: 腫內(nèi)皮標志物8抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Rabbit, Sheep

          Haspin產(chǎn)品名稱: 絲氨suan/蘇氨suan蛋白激mei蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          CDC37產(chǎn)品名稱: Hsp90輔助伴侶分子CDC37抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

          Glutaredoxin 5產(chǎn)品名稱: 谷氧還蛋白5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

          TGF beta Receptor I產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)移生長因子β受體1抗體產(chǎn)品別名: TGF-βRⅠ; TGFβRⅠ; TGF-βR Ⅰ; TGF-β RⅠ.

          HERPUD2產(chǎn)品名稱: HERPUD蛋白家族成員2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep   

          脫氧輔蛋白羥化酶/單加氧酶(DOHH)重組蛋白54kDa核孔蛋白(NUP54)ELISA試劑盒NUP5454kDa核孔蛋白elisa檢測試劑盒Human Nucleoporin 54kDa(NUP54)ELISA Kit

          5'-3'外切核糖核suanmei2(XRN2)ELISA試劑盒XRN25'-3'外切核糖核suanmei2elisa kitHuman 5'-3'Exoribonuclease 2(XRN2)ELISA Kit

          5'-3'外切核糖核suanmei1(XRN1)ELISA試劑盒XRN15'-3'外切核糖核suanmei1ELISA試劑盒Human 5'-3'Exoribonuclease 1(XRN1)ELISA Kit

          4-羥基suan雙加氧mei(HPD)ELISA試劑盒HPD4-羥基suan雙加氧meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Human 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase(HPD)ELISA Kit

          4-氨基丁suan轉(zhuǎn)氨mei(ABAT)ELISA試劑盒ABAT4-氨基丁suan轉(zhuǎn)氨meielisa檢測試劑盒Human 4-Aminobutyrate Aminotransferase(ABAT)ELISA Kit  


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