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          酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白

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          更新時(shí)間:2023-03-23 08:42:10瀏覽次數(shù):360

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Active Acid Sphingomyelinase (ASM)
          種屬 Mus musculus (Mouse,小鼠) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:內(nèi)皮型一氧化氮合mei(eNOS)重組蛋白英文名稱:Recombina Endothelial NOS (eNOS)肌球蛋白輕鏈激mei(MYLK)重組蛋白英文名稱:Recombina Myosin Light Chain Kinase (MYLK)加溶金屬1(MP1)重組蛋白英文名稱:Recombina Pitrilysin Metalloprote

          詳細(xì)介紹

          公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          物種

          酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白

          Active Acid Sphingomyelinase (ASM)

          Mus musculus (Mouse,小鼠)

          商品介紹:

          SMPD1; NPD; SMase; aSMase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 1,Acid Lysosomal; Simply Sphingomyelinase

          酶與激酶

          代謝通路

          神經(jīng)科學(xué)

          物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 97%

          等電點(diǎn):6.9

          應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

          圖片5.png

          圖片1.png


          相關(guān)產(chǎn)品:

          谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)重組蛋白R(shí)ecombinant Aminopeptidase A (ENPEP)

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          脫羧酶樣蛋白1(GADL1)重組蛋白R(shí)ecombinant Aminopeptidase B (RNPEP)   

          注意事項(xiàng):

          1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作                                            

          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

          5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          H2BFWT產(chǎn)品名稱: H2B組蛋白家族成員W蛋白抗體(睪丸特異性)交叉反應(yīng): Human

          英文名稱: Myoglobin英文別名: MYO; MB; MGC13548; PVALB; MYG_HUMAN.

          Cappucci產(chǎn)品名稱: Cappucci蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep, GuineaPig

          PARG產(chǎn)品名稱: 聚ADP核糖水解meiPARG抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

          CRIM1產(chǎn)品名稱: 富含半胱氨suan運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          KLC3產(chǎn)品名稱: 驅(qū)動(dòng)蛋白輕鏈3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse

          factor V產(chǎn)品名稱: 凝因子5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig

          PDE6B產(chǎn)品名稱: 磷suan二酯mei6β抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          ornithine amitransferase產(chǎn)品名稱: 鳥氨suan氨基轉(zhuǎn)移mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse

          GJB3產(chǎn)品名稱: 間隙連接蛋白31抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig   

          酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒CH50兔血清總補(bǔ)體elisa kitRabbit 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit

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          兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒GMP-140兔血漿α顆粒膜蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit

          兔血紅su氧合mei1(HMOX1)ELISA試劑盒HMOX1兔血紅su氧合mei1elisa檢測(cè)試劑盒Rabbit heme oxygenase(decycling)1,HMOX1 ELISA kit

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