含10mL酶解緩沖液;彈性蛋白酶公司正在銷售的產(chǎn)品：G蛋白偶聯(lián)受體C5B抗體Anti-p-NFATc2/FITC 熒光素標記磷酸化NFATc2抗體IgG
G蛋白偶聯(lián)受體33抗體Anti-NF-H/FITC 熒光素標記高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgG
谷受體紅藻離子1抗體Anti-Phospho-Merlin (Ser518) /FITC 熒光素標記磷酸化2型神經(jīng)纖維瘤抗體IgG
一般受體磷酸肌相

產(chǎn)品名稱：含10mL酶解緩沖液;彈性蛋白酶

規(guī)格：1mL
貨號：YS-02X10347

細胞生長實驗 ：細胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細胞鑒定：細胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

 

細胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細胞狀態(tài)，細胞最好在對數(shù)生長期，細胞密度適合，剛剛發(fā)生細胞融合，過密或連成片的細胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細胞前配置，放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，細胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

CA-2 ELISA Kit 大鼠碳酸酐酶2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 TSHR 促甲狀腺素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh GFRA4 GDNF家族受體α-4抗體 規(guī)格 0.2ml

FE ELISA Kit 大鼠鐵蛋白 96T

NLRP7 英文名稱： 富含亮酸重復結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 0.2ml

ARF3 英文名稱： ADP核糖基化因子3抗體 0.2ml

 TSHR 促甲狀腺素受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

OIT3(human oncoprotein induced transcript 3) ELISA Kit 人癌蛋白誘導轉(zhuǎn)錄物3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Beta-HCG 人β亞基人絨毛膜促性腺抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MIRK/Dyrk1B 雙特異性酪磷酸化調(diào)節(jié)激酶1B 規(guī)格 0.2ml

GSTpi(Human glutathione S-transferases0 ELISA Kit 人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因 96T

RNF215 英文名稱： 環(huán)指蛋白215抗體 0.2ml

CHCHD3 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD3抗體 0.1ml

 Beta-HCG 人β亞基人絨毛膜促性腺抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rabbit  Biotin/Gold 膠體金標記的兔抗生物素抗體IgG 0.5ml

GPR3 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體3抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Acetyl-Histone H4(K16) 乙酰化組蛋白H4(K16)抗體 規(guī)格 0.1ml

 MK1/ MAPKK 1/FITC 熒光素標記MK1/ MAPKK 1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Biotin/Cy3 Cy3標記的兔抗生物素抗體IgG 規(guī)格 0.1ml

 TLR9/CD289/FITC 熒光素標記Toll樣受體9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
含10mL酶解緩沖液;彈性蛋白酶動物源性食品鼠源基因檢測試劑盒20次安氏網(wǎng)尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

動物源性食品貓源基因檢測試劑盒20次牛肺線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

動物源性食品狗源基因檢測試劑盒20次愛德華氏菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒

肉類食物樣品處理試劑盒20次產(chǎn)氣腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

植物源性食品杏仁（almond）基因檢測試劑盒20次闊盤吸蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒

植物源性食品榛果（hazelnut）基因檢測試劑盒20次艾美耳球蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒

植物源性食品核桃（walnut）基因檢測試劑盒20次馬皰疹病4型探針法熒光定量PCR試劑盒

植物源性食品山核桃（pecan）基因檢測試劑盒20次大擬片形吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

植物源性食品腰果（cashew）基因檢測試劑盒20次網(wǎng)尾線蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒

植物源性食品開心果（Pistachio）基因檢測試劑盒20次胰闊圓盤吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

植物源性食品花生（peanut）基因檢測試劑盒20次伊蒙微小菌探針法熒光定量PCR試劑盒

植物源性食品小麥（wheat）基因檢測試劑盒20次耐久腸球菌探針法熒光定量PCR試劑盒

植物源性食品大麥（barley）基因檢測試劑盒20次糞腸球菌探針法熒光定量PCR試劑盒

植物源性食品芹菜（cellery）基因檢測試劑盒20次槍狀肝吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

植物源性食品芥末（mustard）基因檢測試劑盒20次鮰愛德華氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒

使用步驟：

一）準確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。