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          上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>定量PCR試劑盒>>探針?lè)晒舛縋CR試劑盒>>50T島青霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

          島青霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

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          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 型號(hào) 50T
          • 品牌 其他品牌
          • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2020-09-30 09:41:40瀏覽次數(shù):443

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          CAS 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
          分子量 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 分子式 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
          貨號(hào) YSP7062 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
          島青霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。

          詳細(xì)介紹

          PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

          循環(huán)步驟

          溫度

          時(shí)間

          循環(huán)數(shù)

          預(yù)變性

          94℃

          5   min

          1

          變性

          94℃

          10   sec

          30-40

          退火

          50-65℃

          20   sec

          30-40

          延伸

          72℃

          30   sec/kb

          30-40

          終延伸

          72℃

          5   min

          1

          【產(chǎn)品名稱】島青霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
          【英文名稱】Penicillium islandicum
          【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7062
          【包裝規(guī)格】50T
          【預(yù)期用途】
          產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過(guò)實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
          【檢驗(yàn)原理】
          本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針?lè)ǎ?duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
          *的擴(kuò)增性能:
          高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高。
          ?
          PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
          島青霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒方法
          1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
          10×PCR buffer                   

          5 μl     dNTP mix (2mM)             
          4 μl     引物1(10pM)                 
          2 μl     引物2(10pM)                 
          2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
          1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
          1 μl      加ddH2O至 50 μl  
          視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
          3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
          4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
          熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
          (1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
          (2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
          產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
          其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
          其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
          實(shí)驗(yàn)步驟:
          典型的PCR由
          (1)高溫變性模板;
          (2)引物與模板退火;
          (3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
          將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
          人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
          耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
          βSitosterol型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白檢測(cè)試劑盒10mg

           趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 3 Like Protein 1 (CCL3L1)

          Ⅲ型膠原(COL3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 DPYS / Dihydropyrimidinase 蛋白*250(g)

          DUTP(Human deoxyuridinetriphate) ELISA Kit  人脫氧尿三CAS號(hào):102767282 α生育酚轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白檢測(cè)試盒50mgHuman/人Elisa試盒37022

          Madecassic acid型肝炎病毒X抗原檢測(cè)試劑盒20mg

          金雀花堿,野靛堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Cytisine

          Shikonin阿立唑雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人多藥耐藥蛋白3(MDR3)ELISA試劑盒 0.2ml

          人FractalkineELL  聚合酶延伸子抗體規(guī)格:96T/48TArticaine Related Compound A規(guī)格:125mgPTEN;MMAC1檢測(cè)試盒10mg人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞,HBMEC細(xì)胞1x10^6cells

          98%500g5gL氨基化酶Protein S100A10

          硫乙醇鹽流體對(duì)照培養(yǎng)基  英文名稱:Fluid thioglycollate control medium   保存:-20℃   規(guī)格:11.9g/400mL 化絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體  

          全胃蛋白胨BRVI型膠原蛋白檢測(cè)試盒20mg谷胱甘肽過(guò)氧化酶檢測(cè)試盒Osteoprotegerin

          98%25g25gDα氨基化酶vasopeptidase inhibitors

          三十六(standard for GC,≥98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥98.0%(GC) Hexatriacontane 萋-泥氏染色液/Ziehl-Neelsen Strain細(xì)菌耐染色液10毫升×3支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

          Lambda BrothBRV型膠原蛋白檢測(cè)試盒20mg骨保護(hù)素檢測(cè)試盒Bonemorphogeneticprotein2

          98%100g100g葡萄糖化酶Adenylate Cyclase 4

          SGI-1776 質(zhì)量規(guī)格:>98%,Pim1抑制劑 SGI-1776;SGI1776 白色綠僵菌 Metarhizium album香菇 Lentinula edodes

          Gelatin PeptoneBR角膜蛋白多糖檢測(cè)試盒20mg骨成型蛋白2檢測(cè)試盒Bonemorphogeneticprotein4
          島青霉探針?lè)晒舛縋CR試劑盒維生素B12 CAS號(hào): 68199 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

          維生素B1 CAS號(hào): CAS:67038 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

          維生素A CAS號(hào): 302794 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

          維生素A醋 CAS號(hào): 127479 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

          脫水羊藿素 CAS號(hào): 118525409 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

          脫水穿心蓮內(nèi)琥珀半 CAS號(hào): 786593064 規(guī)格: HPLC≥99%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

          L天冬酰 CAS號(hào): 70473 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg 訂購(gòu)|咨詢

          L天冬氨 CAS號(hào): 56848 規(guī)格: HPLC≥99%;200mg 訂購(gòu)|咨詢

          L蘇氨 CAS號(hào): 72195 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg 訂購(gòu)|咨詢

          L絲氨 CAS號(hào): 56451 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg 訂購(gòu)|咨詢

          L色氨 CAS號(hào): 73223 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg 訂購(gòu)|咨詢

          L鼠李糖 CAS號(hào): 10030850 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg 訂購(gòu)|咨詢

          茄尼 CAS號(hào): 13190971 規(guī)格: HPLC≥97%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

          千層紙素 CAS號(hào): 480115 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

          10羥癸 CAS號(hào): 1679534 規(guī)格: HPLC≥96%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

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