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          星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒

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          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 型號 50T
          • 品牌 其他品牌
          • 廠商性質 經銷商
          • 所在地 上海市

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          更新時間:2020-09-29 11:22:57瀏覽次數(shù):338

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產品簡介

          CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
          分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
          貨號 YSP7011 應用領域 化工
          主要用途 公司產品僅用于科研    
          星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

          詳細介紹

          參數(shù)規(guī)格:
          產品名稱:星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒
          英文名稱:Nocardia asteroides
          產品規(guī)格:50T
          產品運輸:低溫運輸
          產品保存:-20℃保存
          產品有效期:一年
          產品特點:本產品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
          運輸及保存
          低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
          自備試劑
          DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
          產品及特點:
          1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
          2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
          3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
          4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
          5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
          本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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          實驗過程:
          一、星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
          1. DNA模板
          2.產品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
          3.10×PCR Buffer
          4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
          5.Taq酶
          二、操作步驟
          1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
                10×PCR buffer             5μl
                dNTP mixl                 4μl
                引物1(10pM)               2μl
                引物2(10PM)              2μl
                Taq酶(2U/μl)            1μl
                DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
               加ddH2O至               50 μl
               視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
          2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
          3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
          4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
          使用方法:
          一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
          1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
          2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
          3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
          4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
          5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
          6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
          7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
          二、樣品DNA的制備
          8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
          9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
          三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
          10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
          11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
          以下是公司正在熱銷的產品:
          Betaine鑰孔蟲戚血藍蛋白檢測試劑盒20mg

          辛弗林(標準品) 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品 Synephrine

          17-羥孕(17-OHP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標簽)*1000(g)

          人基質金屬蛋白酶10(MMP10)PhosphoTrkA (Ser791)  化酪氨激酶A抗體規(guī)格:96T/48T規(guī)格:1gE選擇素檢測試盒10mg人狀腺癌細胞,F(xiàn)TC133細胞1x10^6cells

          98%25g1g白花前胡香豆精I58151Chitinase 3like Protein 1

           人腺細胞英文名稱:MX-1

          雌三醇(E3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 S100A4 蛋白 (His 標簽)*250(g)

          人基質金屬蛋白酶1(MMP1)AGPHD1  氨基糖苷類結構域蛋白抗體規(guī)格:96T/48TAmobarbital CII規(guī)格:1gFK506結合蛋白52檢測試盒20mg人狀腺癌細胞,K1細胞1x10^6cells

          魯斯可皂苷元Cy3 亞酰5mg

          6,7-二基香豆  英文名稱:6, 7- two methoxy coumarin   保存:-20℃   規(guī)格:20mg 化蛋白激酶C亞性抗體

          無翅型MMTV整合位點家族成員5檢測試盒20mgP物質檢測試盒PSelectin

          6JOE 亞酰5mg

          姜黃素  英文名稱:Curcumin   保存:-20℃   規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支 四分子交聯(lián)體9/四旋蛋白抗體

          CDCABR,98%腺苷脫氨酶1檢測試盒20mgP選擇素檢測試盒ArgGlyAsp

          去基異波爾定6ROX 亞酰5mg

          蘭雪醌,白花丹醌,白花丹素(標準品) 質量規(guī)格:HPLC≥98%,進口標準品 Plumbagin 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeJAR(人胎盤絨毛膜細胞)

          腺苷脫氨酶1檢測試盒20mgRGD三肽檢測試盒Solubleprotein100B
          星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒異橙黃 CAS號:  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

          月桂卓 CAS號: 59227893 規(guī)格: HPLC≥98%;0.1ml 訂購|咨詢

          油 CAS號: 112801 規(guī)格: 鑒別;0.1ml 訂購|咨詢

          鹽伊立替康 CAS號: 100286906 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

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