參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：無乳支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Mycoplasma agalactiae
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據(jù)機型決定，具體見使用方法）。
產(chǎn)品及特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

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實驗過程：
一、無乳支原體探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2．產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品，必須設(shè)置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進行）
10. 如果只做1次重復(fù)，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
98%25g5g6羥基奈酚 3,6二葡萄糖苷127195Activity Dependent Neuroprotector Protein

 COLO 201(人結(jié)直腸腺細胞)5×106cells/瓶×2

黃體激素(LH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 PFN4 / Profilin 4 蛋白 (His 標簽)*250(g)

ANX V (Human Annexin V ) ELISA Kit  人膜聯(lián)蛋白ⅤCAS號：11072938硫代比妥反應(yīng)物檢測試盒500gHuman/人Elisa試盒304695792

99%100g25g6羥基奈酚75070reactive oxygen species

槐屬苷 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BR Sophoricoside

Hypericin別嘌醇相關(guān)物質(zhì)F標準品規(guī)格：規(guī)格：人水通道蛋白4(AQP-4)Polyclonal Antibody 0.2ml

TBM(Human tubular basement membrane antibogy) ELISA Kit  人抗小管基底膜抗體CAS號：11070738 尼克酰胺N基轉(zhuǎn)移酶檢測試盒100gHuman/人Elisa試盒3047323

槲皮素7葡萄糖苷;槲皮素7OβD葡萄糖苷6羧基2',4,7,7'四熒光素琥珀酰亞  5mg

銅五水(AR) 質(zhì)量規(guī)格：AR,>99% Copper(II) sulfate, pentahydrate 胱天蛋白酶7(CASP7)重組蛋白英文名稱：Recombinant Caspase 7 (CASP7)

Pseudomonas Isolation Broth250CA16抗原檢測試盒5mg雌激素檢測試盒adrencocorticotropichormone

穿心蓮丁素6羧基4',5'二2',7'二基熒光素琥珀酰亞  5mg

番瀉苷C;Sennoside C 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢 大鼠真成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL

Inositol Assay Broth250雌激素受體α檢測試盒5mg促上腺皮質(zhì)激素檢測試盒oxytocin

D無水葡萄糖; 葡萄糖6羧基2',4,4',5',7,7'六熒光素琥珀酰亞 5mg

銀椴苷；椴樹苷 訂購|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/支 γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶6抗體 KRT3 ELISA Kit 角蛋白3(KRT3)ELISA試劑盒

Bromcresol Purple Dextrose Broth250再生胰島衍生3α;胰石蛋白;胰線蛋白檢測試盒5mg催產(chǎn)素檢測試盒prolactin
無乳支原體探針法熒光定量PCR試劑盒橙黃決明素6葡萄糖苷; CAS號：  規(guī)格： 10mg 訂購|咨詢

次大風(fēng)子素;Hydnocarpin CAS號： 51419488 規(guī)格： 10mg 訂購|咨詢

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