詳細(xì)介紹
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:馬爾太蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Marteilia spp.
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
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實驗過程:
一、馬爾太蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
非模式菌株研究子囊菌EpCAM Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C21H26N2O3性狀:Powder純度:98.0% Demethoxyfumitremorgin C特異性: 兔calcyclin mRNA原位雜交試劑盒
Theobromine特異性: 大鼠Capza3 mRNA原位雜交試劑盒
Melamine特異性: 小鼠C1QL3 mRNA原位雜交試劑盒
Sudan III特異性: 小鼠CAMK2G mRNA原位雜交試劑盒
Fangchinoline特異性: 人、大鼠、小鼠Calcitonin receptor mRNA原位雜交試劑盒
Stachydrine hydrochloride特異性: 大鼠Car2 mRNA原位雜交試劑盒
Bilirubin特異性: 小鼠CARD10 mRNA原位雜交試劑盒
Anti-ALDH3A1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-TMEM173 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C28H46N2O性狀:Powder純度:%
Anti-ALDH3A1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-ADRM1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C18H13N3O性狀:Yellow powder純度:97.5%
Anti-ALDH3B1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-Acetyl-Histone H3-K18 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C22H31NO2性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ALDH4A1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-ACCN1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C23H31NO3性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ALDH4A1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-EGFL7 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C22H29NO3性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ALDH6A1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-ACTN4 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C24H33NO4性狀:Powder純度:98.5%
Anti-ALDH7A1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-GMFG Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C24H33NO4性狀:Powder純度:95.0%
Anti-ALDH7A1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-AT2R2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C22H26N2O4性狀:Powder純度:%
Anti-ALDH8A1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-BCL2L15 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C23H28N2O6性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ALDH9A1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名稱: Anti-PRKAA2 Polyclonal Antibody分子式:C14H17NO2性狀:Oil純度:97.0%
Anti-ALDOA Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-NR1H4 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C22H26N2O5性狀:Powder純度:96.0%
Anti-ALDOB Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-CD105 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C13H17NO性狀:Oil純度:97.0%
Anti-ALDOB Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-DDT Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C30H47NO4性狀:Powder純度:97.5%
Anti-ALG1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-VPS35 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C14H19NO2性狀:Oil純度:98.0%
Anti-ALG12 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-UBC Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C12H11NO2性狀:Powder純度:%
Anti-ALG2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-BGLAP Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C21H26N2O3性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ALG2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-GDF9 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C18H13N3O2性狀:Yellow powder純度:97.5%
Anti-ALG9 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-KCNIP2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C21H24N2O3性狀:Powder純度:%
Anti-ALKBH1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-LILRB1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C18H24N2O2性狀:Powder純度:95.0%
Anti-ALKBH1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名稱: Anti-HSPH1 Polyclonal Antibody分子式:C15H20N2O性狀:Powder純度:98.0% Lycorine特異性: 人、大鼠、小鼠Calpain 1 mRNA原位雜交試劑盒
Adenine特異性: 大鼠、小鼠CAMK 2b mRNA原位雜交試劑盒
Brevi* F特異性: 人、大鼠、小鼠Cardiotrophin 1 mRNA原位雜交試劑盒
Benzylamine hydrochloride特異性: 人、大鼠、小鼠Casein Kinase Iα mRNA原位雜交試劑盒
Tryprostatin A特異性: 人、大鼠、小鼠Caspase-10 mRNA原位雜交試劑盒
14-Norpseurotin A特異性: 人、大鼠、小鼠Casein Kinase Ⅱα mRNA原位雜交試劑盒
Bisdethiobis(methylthio)gliotoxin特異性: 人、大鼠、小鼠CAS mRNA原位雜交試劑盒
Anti-ALKBH2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-DSC2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C20H19NO4性狀:Yellow powder純度:98.0%
Anti-ALKBH3 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-CHK1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H22N2O2性狀:Solid純度:97.5%
Anti-ALKBH8 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-BCOR Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H24N2O性狀:Oil純度:96.0%
Anti-ALOX12 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-HTR2B Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H24N2O性狀:Solid純度:96.0%
Anti-ALOX15 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-MRPL11 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C20H24N2O4性狀:Powder純度:%
Anti-ALOX15B Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-RSL1D1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C19H19NO3性狀:Solid純度:98.0%
Anti-ALOX15B Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-SQSTM1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:?母菌,形成有彈射能力的擲孢子。
馬爾太蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒Kir6.1抗體(50ul) Anti-Kir6.1
Kir6.1抗體(25ul) Anti-Kir6.1
Kir6.1抗體(0.2ml) Anti-Kir6.1
Kir5.1抗體(50ul) Anti-Kir5.1