產(chǎn)品簡介
CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP6713 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2020-09-28 10:08:15瀏覽次數(shù):297
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CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP6713 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
【產(chǎn)品名稱】大擬片形吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Fasciola magna
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP6713
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè),所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀,可通過實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針,通過實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR(Taqman探針法)對(duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板,擴(kuò)增β-actin基因,與同類產(chǎn)品相比,UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng),擴(kuò)增效率更高。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
大擬片形吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由
(1)高溫變性模板;
(2)引物與模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
Stachybotrys spp.葡萄狀穗霉屬通用LAMP試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陰性細(xì)菌,細(xì)胞桿狀,周生鞭毛;兼性厭氧,呼吸和發(fā)酵代謝。
Staphylococcus arlettae阿爾萊特葡萄球菌LAMP試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陰性細(xì)菌,兼性厭氧,呼吸和發(fā)酵代謝。
Staphylococcus aureus金黃色葡萄球菌LAMP試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陰性細(xì)菌,兼性厭氧,呼吸和發(fā)酵代謝。
Staphylococcus capitis頭狀葡萄球菌LAMP試劑盒模式菌株分類光合細(xì)菌。Type strain;
Staphylococcus chromogenes產(chǎn)色葡萄球菌LAMP試劑盒模式菌株分類革蘭氏陰性細(xì)菌,兼性厭氧,呼吸和發(fā)酵代謝。模式菌株
Staphylococcus epidermidis表皮葡萄球菌LAMP試劑盒模式菌株分類革蘭氏陰性細(xì)菌,細(xì)胞桿狀;好氧,呼吸代謝。模式菌株
Staphylococcus equorum馬胃葡萄球菌LAMP試劑盒模式菌株分類革蘭氏陰性細(xì)菌。模式菌株
Staphylococcus haemolyticus溶血葡萄球菌LAMP試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陰性細(xì)菌,化能異養(yǎng),兼性厭氧,發(fā)酵代謝。分解TNT
Staphylococcus hominis人葡萄球菌LAMP試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢,厭氧生長。降解含羞草素和二羥基吡啶
Staphylococcus hyicus豬葡萄球菌LAMP試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陰性細(xì)菌,細(xì)胞桿狀,嚴(yán)格好氧,產(chǎn)生棕色水溶性色素。
Staphylococcus intermedius中間葡萄球菌LAMP試劑盒模式菌株分類革蘭氏陰性細(xì)菌,細(xì)胞桿狀,嚴(yán)格好氧,產(chǎn)生棕色水溶性色素。模式菌株
Staphylococcus lugdunensis路鄧葡萄球菌LAMP試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陰性細(xì)菌,菌體桿狀,菌落黃色;嚴(yán)格好氧,呼吸代謝。黃單胞菌膠菌
Staphylococcus nepalensis尼泊爾葡萄球菌LAMP試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢,厭氧生長。嗜熱厭氧分解纖維素
Staphylococcus pseudintermedius偽中間型葡萄球菌LAMP試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢,厭氧生長。嗜熱厭氧分解纖維素
Staphylococcus sciuri松鼠葡萄球菌LAMP試劑盒模式菌株分類嗜鹽古菌。模式菌株
大擬片形吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒tribbles同源物2 TRIB2 Polyclonal Antibody
TRIB1抗體 TRIB1 Antibody
Trek1抗體 Trek1 Antibody,K2p2.1; KCNK2; MGC126742; MGC126744; TPKC1; TREK; TREK-1; TREK1; hTREK-1c; hTREK-1e
TreakR抗體 TreakR Antibody,TNFSF12,TWEAK,MGC20669,MGC129581 ,DR3LG ,
Transferrin抗體 Transferrin Antibody
TRAIL抗體 TRAIL Antibody,TNFSF10,TRAIL-PEN,TL2,Apo-2L,CD253,APO2L
TRAIL抗體 TRAIL Antibody
TRAF6抗體 TRAF6 Antibody,TRAF6,RNF85,MGC:3310
TRAF6抗體 TRAF6 Antibody
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。