產(chǎn)品簡介
CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
---|---|---|---|
分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP6521 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2020-09-25 16:34:28瀏覽次數(shù):266
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CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | YSP6521 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:封閉毛細(xì)線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Capillaria obsignata
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、封閉毛細(xì)線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Nematodirus helvetianus微黃*線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Nematodirus spathiger匙狀*毛樣線蟲PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Nematodirus spathiger匙狀*毛樣線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Nematodirus spathiger匙狀*毛樣線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Nematodirus spp.*線蟲通用PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Nematodirus spp.*線蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Nematodirus spp.*線蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Neospora caninum犬新孢子蟲PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Neospora caninum犬新孢子蟲染料法熒光定量PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Neospora caninum犬新孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Neospora hughsi休斯新孢子蟲PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Neospora hughsi休斯新孢子蟲染料法熒光定量PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Neospora hughsi休斯新孢子蟲探針法熒光定量PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Neospora spp.新孢子蟲通用PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
Neospora spp.新孢子蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒非模式菌株研究革蘭氏陽性細(xì)菌,形成芽孢。
封閉毛細(xì)線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒內(nèi)皮型一氧化氮合酶(phosphoSer1177) NOS3 (phospho Ser1177) Polyclonal Antibody
內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子 ESAM Polyclonal Antibody
內(nèi)皮細(xì)胞特異分子1 ESM1 Polyclonal Antibody
內(nèi)皮細(xì)胞TEK酪氨酸激酶 TIE2 Polyclonal Antibody
內(nèi)皮糖蛋白/內(nèi)皮素 Endoglin Polyclonal Antibody
內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2 ECE2 Polyclonal Antibody
內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1 ECE1 Polyclonal Antibody
內(nèi)皮素2 EDN2 Polyclonal Antibody
內(nèi)凝集蛋白1 ITLN1 Polyclonal Antibody