詳細(xì)介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)測試盒說明書
規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣
測試方法:微量法、可見分光光度法
貨號:YS-01S6415
測定意義
GPT(EC 2.6.1.2)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化氨基酸和酮酸轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),在氨基酸代謝中具有重要作用。此外,哺乳動物肝細(xì)胞GPT活性很高,當(dāng)肝細(xì)胞壞死,GPT釋放到血液中,血清GPT活性顯著增高。因此,GPT被世界衛(wèi)生組織推薦為肝功能損害最敏感的檢測指標(biāo)。
測定原理
GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),生成丙酮酸和谷氨酸;加入2,4-二硝基肼溶液,不僅終止上述反應(yīng),而且與酮酸中的羰基加成,生成丙酮酸苯腙;苯腙在堿性條件下呈紅棕色,可以在505nm讀取吸光值并計算酶活力。
試驗中所需的儀器和用品
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點:
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化P63抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/Biotin 生物素化兔抗小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
細(xì)胞表面趨化因子受體1抗體 Anti-CXC-R1 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
FLASH 英文名稱: 半胱酸蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Vimentin (Ser56) 磷酸化波形蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG/Biotin 生物素化兔抗小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Angiopoietin 2 血管生成素2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Beta-Catenin(Ser45) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
單組分TMB底物液 12ml/100ml 進(jìn)口分裝
VSIG4 英文名稱: T細(xì)胞負(fù)調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.1ml
DLGAP2 英文名稱: PSD95結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
Anti-Angiopoietin 2 血管生成素2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Synaptojanin 2 英文名稱: 磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5H抗體 0.2ml
Estrogen Receptor alpha 英文名稱: 雌受體α抗體 0.1ml
組織蛋白酶D抗體 Anti-cath-D/CD/Cathepsin D 0.1ml
Anti-UCP-1/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-HMGCR(Ser872) 磷酸化三羥基基A還原酶抗體 規(guī)格 0.1ml
CCR-4(C-C chemokine receptor 4) 細(xì)胞表面趨化因子受體4抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)測試盒說明書對氨基酚(>98%,BR)人絨毛膜促性腺(曾用名:絨促性素)凍切片組織組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測試劑盒
1,4-雙(5-苯基-2-噁唑基)苯(>98%,Scint Grade)內(nèi)素石蠟切片組織組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測試劑盒
(>98%,BC)內(nèi)素 載玻片組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
氟化(>98%,BR)內(nèi)素 凍切片組織組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
2,5-二苯基惡唑(>98%,BC)不銹鋼筒 石蠟切片組織組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
乙酸鈉(>98%,BR)封口膜 組蛋白H3-K4甲基化比色法定量檢測試劑盒?。ㄡ槍σ患谆?/span>
司班60鋁薄紙 組蛋白H3-K4甲基化比色法定量檢測試劑盒(針對二甲基、基)
二氧化鈦(>99%,BR)無熱原吸頭 組蛋白H3-K4甲基化熒光定量檢測試劑盒
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。