近年來(lái)，隨著生物醫(yī)藥技術(shù)的快速發(fā)展，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、商業(yè)應(yīng)用和生物制品等多個(gè)領(lǐng)域。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于分離、增殖和鑒定病毒，也適用于篩選抗癌藥物和對(duì)有毒物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)等方面的研究。
可以利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行大規(guī)模生物制品研發(fā)，如單克隆抗體、疫苗及重組蛋白的制備、藥物開(kāi)發(fā)、干細(xì)胞移植、人造器官培養(yǎng)等。因此，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已成為科學(xué)研究和醫(yī)藥制品開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵因素之一。
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中使用的培養(yǎng)基主要包括合成細(xì)胞培養(yǎng)基和天然細(xì)胞培養(yǎng)基，其中應(yīng)用廣泛的是天然培養(yǎng)基。血清是一種在體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)加入的物質(zhì)，它是在血漿中去除纖維蛋白原而分離出的一種成分十分復(fù)雜的混合物，用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清。
血清中富含細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中具有重要作用但實(shí)際生產(chǎn)中血清提取工藝復(fù)雜，成本高昂，給大規(guī)模生產(chǎn)帶來(lái)困難，不利于商業(yè)化開(kāi)發(fā)，且血清成分復(fù)雜，無(wú)法有效質(zhì)控，常見(jiàn)細(xì)胞源疫苗血清殘留對(duì)疫苗免疫效果有很大的影響。
疫苗生產(chǎn)多采用M199、DMEM、MEM等培養(yǎng)基加新生牛血清的方式，但由于血清成分的復(fù)雜性和不確定性，疫苗生產(chǎn)企業(yè)期待新型無(wú)血清培養(yǎng)基的上市。近年來(lái)，市面上出現(xiàn)了無(wú)血清培養(yǎng)基。無(wú)血清培養(yǎng)已成為包括疫苗在內(nèi)的生物技術(shù)藥物生產(chǎn)的總趨勢(shì)。由于無(wú)血清培養(yǎng)基可*采用已知分子結(jié)構(gòu)或構(gòu)型組分的低蛋白, 甚至*不采用蛋白組分, 因此被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞工程領(lǐng)域。
締一生物為您介紹一款可無(wú)血清培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)基，由上HiMedia公司生產(chǎn)M199改良型——SFRE 199細(xì)胞培養(yǎng)基。SFRE 199分為I型和II型，即SFRE 199-1和SFRE 199-2。開(kāi)始研發(fā)是為了生長(zhǎng)和維持培養(yǎng)Bak細(xì)胞（原代狒狒腎細(xì)胞）。
SFRE-199將M199標(biāo)準(zhǔn)配方中的精氨酸增加到150mg/L，半胱氨酸增至4mg/L，胱氨酸增至40mg/L，谷氨酰胺增至300mg/L，谷氨酸增至75mg/L，甘氨酸增至100mg/l，組氨酸增至40mg/L，酪氨酸增至80mg/L，以獲得較好的細(xì)胞生長(zhǎng)而未表現(xiàn)出毒性。另外，還降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于，前者含有Hank's鹽，而后者所含為Earle's鹽。與加胎牛血清的常規(guī)培養(yǎng)基比較，細(xì)胞生長(zhǎng)速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同。均在移植后第6天單層細(xì)胞達(dá)到充分融合。
有報(bào)道，在SFRE 199-1生長(zhǎng)的原代Bak細(xì)胞的群體二倍分裂時(shí)間(PDT)約為34.2小時(shí)，與加有5%牛血清的HLH(含水解乳白蛋白的HBSS)相同，加有3%胎牛血清的M199的PDT為36小時(shí)。如果在SFRE 199-1中去除胰島素或硫酸鋅，則細(xì)胞不能融合，PDT延長(zhǎng)。若含有胰島素和硫酸鋅，則其支持生長(zhǎng)的能力相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照血清培養(yǎng)基。
近年來(lái)，無(wú)血清培養(yǎng)基的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，但也各有利弊，本文締一生物為您介紹無(wú)血清培養(yǎng)基的主要優(yōu)缺點(diǎn)：
優(yōu)點(diǎn)：
①無(wú)血清培養(yǎng)基不含血清，提高了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性、準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性；
②避免了血清所帶來(lái)的血源性污染等問(wèn)題，減少血清未知成分對(duì)細(xì)胞的損傷；
③無(wú)血清培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)來(lái)源于重組蛋白或蛋白水解產(chǎn)物，提高了實(shí)驗(yàn)效率；
④無(wú)血清培養(yǎng)基的成分和含量相對(duì)明確，能提高細(xì)胞產(chǎn)品的質(zhì)量并有利于產(chǎn)物的分離提純；⑤無(wú)血清培養(yǎng)基在生物醫(yī)藥等領(lǐng)域有著極大的應(yīng)用潛能；
⑥制備流程簡(jiǎn)易，操作簡(jiǎn)單。
缺點(diǎn)：
①無(wú)血清培養(yǎng)基的生產(chǎn)成本較高，不利于商業(yè)化開(kāi)發(fā)與應(yīng)用；
②目前低血清培養(yǎng)基研究開(kāi)發(fā)的相關(guān)數(shù)據(jù)缺乏在線交流，可查閱的資料有限，不能有效促進(jìn)細(xì)胞馴化技術(shù)的發(fā)展；
③多數(shù)無(wú)血清培養(yǎng)基的應(yīng)用不廣泛，通用性較低，不具有普遍性；
④細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基中，對(duì)外界條件如物理和化學(xué)等因素的改變較敏感。
締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商，在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域，一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。
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