在細胞培養(yǎng)中大多數(shù)動物細胞體外培養(yǎng)時都需要加入血清提供營養(yǎng),但由于血清存在很多潛在風險,促使科學家們進行無血清馴化細胞的研究。20 世紀 50 年代后期,研究者發(fā)現(xiàn)添加少量血清就能滿足細胞培養(yǎng)的基本營養(yǎng)需求,隨后科學家們開始用一些營養(yǎng)因子代替血清中某些已知成分用于細胞培養(yǎng)。
Hayashi 等在1976 年提出了無血清培養(yǎng)基的概念,此后,大量生物醫(yī)藥學家開始對無血清培養(yǎng)基進行研制。80 年代后,無血清培養(yǎng)基的研究與制備廣泛發(fā)展,到 90 年代已有一些商業(yè)化無血清培養(yǎng)基。相關法律法規(guī)對血清的研發(fā)及使用提出了限制。2000 年版《中國生物制品主要原輔料質(zhì)控標準》中就對血清的質(zhì)量有了較為嚴格的要求,而后國家藥品監(jiān)督管理局在2003 年專門頒布了與血清相關的《細胞培養(yǎng)用牛血清生產(chǎn)和質(zhì)量控制技術指導原則》用于規(guī)范細胞培養(yǎng)用牛血清的生產(chǎn)、質(zhì)量控制,促進牛血清質(zhì)量的提高。
從上看,2010 年,美國和歐盟等國家已停止在生物制藥中使用血清,美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)也停止了對含有血清的細胞培養(yǎng)技術及新藥的受理。各國對添加血清
培養(yǎng)液生產(chǎn)出的疫苗逐年進行控制,使無血清培養(yǎng)細胞包括生產(chǎn)疫苗和生物藥物等技術成為發(fā)展趨勢。
實踐已證明無血清培養(yǎng)基不僅能在很大程度上避免或改善含血清培養(yǎng)基所帶來的缺陷,也能取得較好的培養(yǎng)效果。并且由于其明確的成分組成,可避免血清的不同批次或不明組分對細胞培養(yǎng)及試驗研究的影響,從而提高結(jié)果的可重復性。由于這些優(yōu)點,無血清細胞培養(yǎng)技術的研究日益得到人們的重視。
無血清培養(yǎng)基是在合成培養(yǎng)基的基礎上發(fā)展起來,旨在尋求血清的替代成分,使其既能滿足細胞培養(yǎng)的要求又能避免血清所帶來的不利影響。
例如,由生物公司HiMedia公司生產(chǎn)的SFRE199-1和SFRE199-2。SFRE Medium 199系列是對基礎培養(yǎng)基M199培養(yǎng)基的改良,起初用于原代狒狒腎(Bak)細胞的生長和維持。培養(yǎng)基在M199培養(yǎng)基基礎上添加了丙酮酸鈉、硫酸鋅,并提高了精氨酸-鹽酸、半胱氨酸、胱氨酸、L -谷氨酰胺、L -谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、酪氨酸和葡萄糖的濃度,使其實現(xiàn)大的無毒活性。SFRE 199 -2還添加了半乳糖,以避免乳酸過度積累,并使pH值在細胞延長的維持期內(nèi),保持在生理范圍。AT089是SFRE 199-1培養(yǎng)基,含有Hank鹽;AT090是SFRE 199-2培養(yǎng)基,含有Earle's鹽,均不含胰島素,因此在使用前必須單獨添加。有報道,SFRE199系列培養(yǎng)基,可用于Vero細胞無血清培養(yǎng)。
締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在細胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)和檢測領域,一如既往地為您帶來的服務。
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