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          Jurkat(Clone E6-1)細胞培養(yǎng)攻略

          閱讀:686      發(fā)布時間:2023-12-29
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          Jurkat(Clone E6-1)概述:

           

          Jurkat(Clone E6-1)細胞,人T淋巴細胞白血病細胞,是肯德爾·史密斯博士將Jurkat細胞在41°C孵育48h,于巨噬細胞上進行有限稀釋克隆得到的,Jurkat(Clone E6-1)細胞是從14歲男性急性T細胞白血病患者的外周血建立的。在用佛波酯和針對T3抗原的凝集素或單克隆抗體刺激后產生大量的IL-2(需要兩種刺激物誘導IL-2的產生)??捎糜诿庖呦到y(tǒng)疾病研究、免疫學和免疫腫瘤學研究,該細胞株克服了Jurkat細胞系建立初期易被支原體污染的缺點。


          圖 Jurkat細胞系譜

           

          Jurkat(Clone E6-1)基本信息:

           


          細胞形態(tài)

          淋巴細胞樣

          生長特性

          單個或成團,懸浮生長

          生長培養(yǎng)基

           RPMI-1640(abs9484)+10%FBS(abs972)+1%P/S(abs9244)

          倍增時間

          約20h

          換液

          每2-3天一次(具體時間取決于細胞密度)

          凍存液

          DMSO:FBS:DMSO=1:2:17




           

          圖 Jurkat(Clone E6-1)形態(tài)圖

           

          Jurkat(Clone E6-1)換液方法:

           

          補液法:培養(yǎng)過程中發(fā)現培養(yǎng)基變黃,則補加適量的新鮮培養(yǎng)基(1-2mL左右),補充2-3次后,1200rpm (約250g)3min,全部離心,棄上清,將細胞沉淀重懸于新的培養(yǎng)基中;

           

          半換液法:豎起培養(yǎng)瓶靜置一段時間(10min左右),待細胞沉入底部,小心吸出約一半的培養(yǎng)基,轉移到離心管離心,若有細胞沉淀,用少量培養(yǎng)基重選后再移入培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)瓶瓶補充新鮮培養(yǎng)基;

           

          注意:上述過程中若發(fā)現細胞密度超過1×106 cells/mL則考慮換液,建議細胞密度保持在1×105-1×106cells/mL, 細胞密度不可超過3×106/mL。


          圖 半換液示意圖

           

          培養(yǎng)要點:

           

          1、該細胞受密度影響較大,低密度時細胞生長速度較慢,接種和培養(yǎng)時注意細胞密度;
          2、Clone E6-1復蘇后有時需要5-7d才能恢復到凍存前的狀態(tài),前兩天勿對其進行操作;
          3、建議凍存密度提高到2-3×106/mL,凍存率可達到70%左右;
          4、若發(fā)現較大細胞團,可用槍頭輕微吹散,切勿用力過度,對其產生機械刺激。

           

          Jurkat(Clone E6-1)的應用:

           

          1、Jurkat(Clone E6-1)已被廣泛用作TCR信號通路的遺傳和生化分析的有力工具;

          2、Jurkat和Jurkat(Clone E6-1)都可用于成像研究,以確定超抗原特異性結合物中免疫突觸(IS)組裝的關鍵;


          圖 E6.1 LFA-1high和Raji細胞(APC)的15min綴合物進行免疫熒光分析

           

          3、Jurkat細胞模型已廣泛應用于T細胞信號轉導、細胞因子和受體的表達, 以及各類感染性疾病的治療和機制研究中, 如HIV、EB、丙型肝炎等病毒的感染研究,其實驗結果可作為人周圍血淋巴細胞培養(yǎng)實驗的基礎研究和前期實驗。

           

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          *本文圖片來源于網絡,僅供學習參考用


          參考文獻


          [1] Cassioli C, Balint S, Compeer EB, et al. Increasing LFA-1 Expression Enhances Immune Synapse Architecture and T Cell Receptor Signaling in Jurkat E6.1 Cells. Front Cell Dev Biol. 2021;9:673446. Published 2021 Jul 23. doi:10.3389/fcell.2021.673446
          [2] Chen JL, Nong GM. [Advances in application of Jurkat cell model in research on infectious diseases]. Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi. 2018 Mar;20(3):236-242. Chinese. doi: 10.7499/j.issn.1008-8830.2018.03.014. PMID: 29530126; PMCID: PMC7389782.
           

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