目錄:愛(ài)必信(上海)生物科技有限公司>>免疫學(xué)試劑>>IHC/IF常用試劑>> abs964考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(常規(guī)型)R250
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更新時(shí)間:2024-07-09 08:01:09瀏覽次數(shù):922評(píng)價(jià)
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CAS | - | 純度 | - |
---|---|---|---|
分子量 | - | 分子式 | - |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1kit |
貨號(hào) | abs964 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳凝膠的常規(guī)染色和脫色,或Weste |
產(chǎn)品描述:
考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(Commassie Blue StainingKit)采用了經(jīng)典的考馬斯亮藍(lán)染色和脫色方法,以考馬斯亮藍(lán)R250為染料,可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳凝膠的常規(guī)染色和脫色,或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測(cè)。
組分:
編號(hào) | 名稱(chēng) | 規(guī)格 |
A | 考馬斯亮藍(lán)染色液 | 100ml |
B | 考馬斯亮藍(lán)染色脫色液 | 500ml |
1、常規(guī)染色脫色方法:
(1)電泳結(jié)束后,取凝膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
(2)置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫染色 1h 或更長(zhǎng)時(shí)間。
注:具體的染色時(shí)間取決于凝膠的厚度和染色時(shí)的溫度。凝膠較厚,溫度較低,則染色時(shí)間 宜適當(dāng)延長(zhǎng)。凝膠較薄,溫度較高,則染色時(shí)間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染 色液的顏色非常接近,在染色液中幾乎看不清凝膠時(shí),可以認(rèn)為已染色充分。
(3)倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少 2-3 次。
(4)加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。
(5)置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫脫色 4-24h。期間更換脫色液 2-4 次,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色 1-2h 后即可出現(xiàn)。
注:脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。
(6)完成脫色后,可把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶 漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含 20%甘油的水中。長(zhǎng)期保存可以制備干膠。
2、快速染色脫色方法:
(1)電泳結(jié)束后,取膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中,微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰, 立即停止加熱。通常大于 10%的膠比較堅(jiān)韌,在煮沸時(shí)不易破損;對(duì)于小于 10%的膠,宜 盡量避免煮沸,以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。
(2)隨后在染色液溫度較高的情況下,在室溫?fù)u床上搖動(dòng) 5-10min。
(3)倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少 2-3 次。
(4)加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。
(5)微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。
(6)隨后在脫色液溫度較高的情況下,在搖床上搖動(dòng) 5-10min。此時(shí)通常可以觀(guān)察到比較清楚的蛋白條帶。
(7)更換新鮮的脫色液,重復(fù)步驟 5 和步驟 6,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。
(8)完成脫色后,可以把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含 20%甘油的水中。長(zhǎng)期保存可以制備干膠。
注意事項(xiàng):
為了您的自身安全,使用試劑前,請(qǐng)做好防護(hù),如穿實(shí)驗(yàn)服,帶手套等。
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