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描述：

組織微環(huán)境中有復(fù)雜的細胞組成，這些細胞的表型、狀態(tài)、豐度、分布都有著重要的生物學(xué)意義和臨床價值。借助抗體染色可以將其在組織原位上呈現(xiàn)出來。免疫組化染色是一種研究組織形態(tài)和原位蛋白表達的常見技術(shù)，常規(guī)IHC檢測只能展示單一指標，難以呈現(xiàn)復(fù)雜的組織微環(huán)境中的細胞組成、狀態(tài)和關(guān)系，而這些信息對疾病的診斷和治療至關(guān)重要！
酪氨信號放大技術(shù)原理：類似常規(guī)免疫組化的DAB顯色方法，TSA技術(shù)同樣采用HRP標記的二抗，HRP催化加入體系的熒光素底物，生產(chǎn)活化熒光底物，活化底物可與抗原上的酪an酸共價結(jié)合，使樣品上穩(wěn)定的共價結(jié)合熒光素。之后用熱修復(fù)法洗去非共價結(jié)合的抗體，在換下一種一抗來第二輪孵育，換另一種熒光素底物，如此往復(fù)就可實現(xiàn)多重標記。

檢驗原理：

多重?zé)晒饷庖呓M化染色是基于抗原、抗體特異性結(jié)合的原理，選用辣根過氧化物酶（HRP）標記的二抗抗體，對試劑盒中的熒光染料進行活化，將信號共價結(jié)合到抗原上。借助于不同的熒光染料標記，通過多輪染色循環(huán)實現(xiàn)組織或細胞的原位多靶點染色。

產(chǎn)品組成：

TSA單色熒光染料480、TSA單色熒光染料520、TSA單色熒光染料570、TSA單色熒光染料620、TSA單色熒光染料700、TSA單色熒光染料770、信號放大反應(yīng)液、抗兔HRP標記二抗、抗熒光淬滅封片劑、DAPI.

應(yīng)用：

主要用于組織、石蠟切片、TMA芯片的免疫組化染色。

使用方法：

1. 熒光染料的稀釋：若染料為干粉，使用100ulDMSO溶解，制成100X染料母液；若染料為液態(tài)表示出廠即為DMSO溶解的100X母液；使用信號放大反應(yīng)液按1:100稀釋制備染料工作液（現(xiàn)用現(xiàn)配）；DAPI使用無菌水按1:100稀釋制備工作液。

2. 二抗的使用：試劑盒為抗兔二抗，實驗前請核實一抗種屬是否匹配。鼠兔通用二抗請參考（#abs50037）。

存儲/保存方法：

熒光染料需避光保存，2～8℃儲存，收到貨起有效期為12個月。

注意事項：

1. 本試劑盒只用于免疫組化，不做其他用途。

2. 本試劑盒僅限于專業(yè)人員使用。

3. 應(yīng)采用適當(dāng)?shù)姆雷o措施，以避免試劑同皮膚和眼睛接觸。

4. 超過有效期的試劑活性可能降低，因此不得使用超過有效期的試劑。

5. 若將本試劑盒的染色組分與其他公司的產(chǎn)品混合使用，在染色過程中可能出現(xiàn)異常情況。

6. 脫蠟不好，容易影響染色效果。

7. 為了防止可能出現(xiàn)的假陰性、假陽性結(jié)果，實驗過程中需有陽性對照及陰性對照同時進行。

8. 使用本試劑盒中所產(chǎn)生的各種廢棄物都應(yīng)按照《醫(yī)療廢物管理條例》進行處理。

參考文獻：

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2. Xin Guan, et al., Nanoparticle-enhanced radiotherapy synergizes with PD-L1 blockade to limit post-surgical cancer recurrence and metastasis. Nature Communication. 2022 May 20
3. Qian-Yue Zhang, et al., Lymphocyte infiltration and thyrocyte destruction are driven by stromal and immune cell components in Hashimoto’s thyroiditis. Nature Communications. 2022 Feb 9
4. Dabbs David J. 診斷免疫組織化學(xué)(M). 北京：北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2008.9.
5. 美】Ed Harlow, David Lane. 抗體技術(shù)指南(M). 北京：科學(xué)出版社，2002:79-80,105.
6. Stack, E. C., et al., Multiplexed immunohistochemistry, imaging, and quantitation: a review, with an assessment of Tyramide signal amplification, multispectral imaging and multiplex analysis. Methods, 2014 70 (1): 46-58.
7. 錢幫國. 焦磊. 多標記免疫熒光染色及多普成像技術(shù)在組織學(xué)研究中的應(yīng)用. 中國組織化學(xué)與細胞化學(xué)雜志, 2017 (4): 373-382.